Ny fahazoana sy fizarana otrikaina dia mampifandray ny fitadiavana sakafon'ny bibikely sy ny toetran'ny fiainany. Mba hanonerana ny tsy fahampian'ny otrikaina manokana amin'ny dingana samihafa amin'ny fiainana, ny bibikely dia afaka mahazo ireo otrikaina ireo amin'ny alàlan'ny famahanana fanampiny, ohatra, amin'ny alàlan'ny fihinanana tsiranoka avy amin'ny biby manana hazon-damosina amin'ny dingana fantatra amin'ny anarana hoe dobo filomanosana. Toa tsy ampy sakafo ny moka Anopheles arabiani ka mila otrikaina ho an'ny metabolisma sy ny fananahana. Ny tanjon'ity fanadihadiana ity dia ny hanombana raha toa ka manatsara ny toetran'ny fiainany ny fikororohana ny An. arabiensis amin'ny fisotron'omby mba hahazoana otrikaina.
Ataovy azo antoka fa azo antoka izany. Voasarika tamin'ny fofon'ny fisotron'omby vaovao, 24 ora, 72 ora, ary 168 ora ny arabiensis, ary norefesina tamin'ny olfactometer fantsona-Y ireo vavy mitady mpampiantrano sy mihinana ra (48 ora aorian'ny sakafo), ary nojerena ny vavy bevohoka mba hanaovana fitsapana fanatodizana. Avy eo dia nampiasaina ny fanadihadiana simika sy elektrofiziolojika mitambatra mba hamantarana ireo akora bioaktiva ao amin'ny fisotron'omby amin'ny sokajin-taona efatra. Nojerena tamin'ny fitsapana fantsona-Y sy tany an-tsaha ny fifangaroan'ny akora bioaktiva vita amin'ny akora. Mba handinihana ny fisotron'omby sy ny akora urea misy azota ao aminy ho sakafo fanampiny mety ho an'ny mpitondra tazomoka, dia norefesina ny masontsivana momba ny sakafo sy ny toetran'ny tantaram-piainana. Nojerena ny isan'ny moka vavy sy ny habetsahan'ny fisotron'omby sy ny urea voaray. Rehefa avy nihinana, dia nojerena ny fahavelomana, ny sidina mifamatotra, ary ny fananahana ny vavy.
Mitady ny ran'ny mpampiantrano sy ny sakafony. Tao amin'ny fanadihadiana tao amin'ny laboratoara sy tany an-tsaha, ny Arabo dia voasarika tamin'ny fofona voajanahary sy sentetika avy amin'ny amanin'omby vaovao sy efa antitra. Ny vavy bevohoka dia tsy niraika tamin'ny fihetsiky ny amanin'omby tany amin'ny toerana fanatodizana. Ny vavy mitady mpampiantrano sy mitsentsitra ra dia mandray mavitrika ny amanin'omby sy ny urea ary mizara ireo loharanon-karena ireo araka ny fifanakalozana eo amin'ny fiainana sy ny tantaram-piainana ho toy ny fiasan'ny toe-batana ho an'ny sidina, ny fahavelomana, na ny fananahana.
Fahazoana sy fizarana ny amanin'omby Anopheles arabinis mba hanatsarana ny toetran'ny androm-piainany. Ny famahanana fanampiny ny amanin'omby dia misy fiantraikany mivantana amin'ny fahafahan'ny biby mitondra ny tsimokaretina amin'ny alàlan'ny fampitomboana ny fahavelomana isan'andro sy ny hakitroky ny biby mitondra ny tsimokaretina, ary ankolaka amin'ny alàlan'ny fanovana ny asan'ny sidina ary noho izany dia tokony hodinihina amin'ny modely ho avy.
Ny fahazoana sy fizarana otrikaina dia mampifandray ny toetran'ny bibikely amin'ny fitadiavana sakafo sy ny tantaram-piainany [1,2,3]. Afaka mifantina sy mahazo sakafo ny bibikely ary manao famahanana mifototra amin'ny fisian'ny sakafo sy ny filàna otrikaina [1, 3]. Miankina amin'ny fizotran'ny tantaram-piainana ny fizarana otrikaina ary mety hitarika amin'ny fepetra takiana samihafa amin'ny kalitao sy ny habetsahan'ny sakafo amin'ny dingana samihafa amin'ny fiainan'ny bibikely [1, 2]. Mba hanonerana ny tsy fahampian'ny otrikaina manokana, ny bibikely dia afaka mahazo ireo otrikaina ireo amin'ny alàlan'ny famahanana fanampiny, toy ny amin'ny fotaka, ny diky sy ny tsiranoka isan-karazany amin'ny biby manana hazon-damosina, ary ny fatin'ny bibikely, dingana fantatra amin'ny anarana hoe dobo filomanosana [2]. Na dia voafaritra voalohany aza ny karazana lolo sy kalalao isan-karazany, dia misy ihany koa ny lavaka fandrotsahana rano amin'ny karazana bibikely hafa, ary ny fisarihana sy ny fihinanana ireo karazana loharanon-karena ireo dia mety hisy fiantraikany lehibe amin'ny fahasalamana sy ny toetra hafa amin'ny tantaram-piainana [2, 4, 5, 6], 7]. Ny moka tazomoka Anopheles gambiae sensu lato (sl) dia miseho ho olon-dehibe 'tsy ampy sakafo' [8], ka ny fandrotsahana rano dia mety mitana anjara toerana lehibe amin'ny toetran'ny tantaram-piainany, saingy hatreto dia tsy noraharahaina io fitondran-tena io. Ny fampiasana ny fikororohana ho fomba iray hampitomboana ny fihinanana otrikaina ao amin'ity fitaovana manan-danja ity dia mendrika ny hojerena satria mety hisy fiantraikany lehibe amin'ny epidemiolojia izany.
Voafetra ny fihinanana azota ao amin'ny moka Anopheles vavy lehibe noho ny tahiry kaloria ambany avy amin'ny dingana larval sy ny tsy fahombiazan'ny fampiasana ny sakafon-dra [9]. Ny Ann.gambiae sl vavy dia mazàna manonitra izany amin'ny alàlan'ny fanampiana sakafon-dra fanampiny [10, 11], ka mahatonga ny olona maro kokoa ho voan'ny aretina ary mametraka ny moka amin'ny risika lehibe kokoa amin'ny fandriban'olona. Raha tsy izany, ny moka dia afaka mampiasa ny famahanana fanampiny amin'ny diky vertebrate mba hahazoana akora azota izay manatsara ny fampifanarahana sy ny fahaiza-mihetsika amin'ny sidina, araka ny asehon'ny bibikely hafa [2]. Amin'io lafiny io, ny fisarihana matanjaka sy miavaka amin'ny iray amin'ireo karazana iray tampo ao amin'ny An. Ny fitambaran'ny karazana Gambiana sl, Anopheles arabinis, dia mahaliana. Ny Anopheles arabinis dia manararaotra amin'ny safidiny amin'ny mpampiantrano ary fantatra fa mifandray amin'ny omby sy mihinana azy. Ny amanin'omby dia loharano manankarena amin'ny akora azota, miaraka amin'ny urea mitentina 50-95% amin'ny totalin'ny azota ao amin'ny amanin'omby vaovao [15, 16]. Rehefa mihantitra ny amanin'omby, ny zavamananaina bitika dia mampiasa Ireo loharanon-karena ireo dia mampihena ny fahasarotan'ny akora azota ao anatin'ny 24 ora [15]. Miaraka amin'ny fitomboan'ny amoniaka haingana, mifandraika amin'ny fihenan'ny azota organika, dia miroborobo ny zavamananaina bitika alkalofilika (izay maro amin'izy ireo no mamokatra akora misy poizina ho an'ny moka) [15], izay mety ho vehivavy. Ny Ann.arabiensis dia voasarika kokoa amin'ny urine izay efa 24 ora na latsaka [13, 14].
Ato amin'ity fandalinana ity, dia nojerena ny Ans mpampiantrano sy ny an'ny ra. Nandritra ny tsingerin'ny gonadotropin voalohany, dia nojerena ny fahazoana akora azota, anisan'izany ny urea, amin'ny alàlan'ny fifangaroan'ny urine, ny arabiensis. Avy eo, dia nisy andiana fanandramana natao mba hanombanana ny fomba anomezan'ny moka vavy ity loharanon-tsakafo mety ho an'ny fahavelomana tsara kokoa, ny fiterahana ary ny fitadiavana sakafo bebe kokoa. Farany, dia nojerena ny fofon'ny urine omby vaovao sy efa antitra mba hamaritana raha toa ka manome famantarana azo antoka ho an'ny An mpampiantrano sy ny an'ny ra ireo. Nandritra ny fikarohan'izy ireo ity loharanon-tsakafo mety ho an'ny omby ity, dia nahita fifandraisana simika ao ambadiky ny fahasamihafan'ny fahasarika hita maso ny arabiensis. Ny fifangaroan'ny fofona sentetika amin'ny akora organika mihelina (VOC) hita ao amin'ny urine efa antitra 24 ora dia nojerena bebe kokoa teo ambanin'ny toe-javatra eny an-tsaha, nanitatra ny valiny azo teo ambanin'ny toe-javatra laboratoara ary naneho ny fiantraikan'ny fofon'ny urine omby amin'ny toe-javatra ara-batana samihafa. Ny fahasarika moka. Ny valiny azo dia manamafy fa ny An. arabiensis dia mahazo sy mizara akora azota hita ao amin'ny urine vertebrate mba hisy fiantraikany amin'ny toetran'ny tantaram-piainana. Ireo valiny ireo dia resahina ao anatin'ny toe-javatra misy ny voka-dratsin'ny epidemiolojika sy ny fomba azo ampiasana azy ireo amin'ny fanaraha-maso sy ny fanaraha-maso ny vector.
Ny Anopheles arabicans (karazana Dongola) dia notazonina tamin'ny mari-pana 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH ary tsingerin'ny hazavana:maizina 12:12 ora. Ny olitra dia notezaina tao anaty lovia plastika (20 sm × 18 sm × 7 sm) nofenoina rano voadio ary nomena sakafo ho an'ny trondro Tetramin® (Tetra Werke, Melle, DE). Ny pupae dia nangonina tao anaty kaopy 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) ary avy eo dia nafindra tao amin'ny tranom-borona Bugdorm (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science, Taichung, Taiwan) mba ahafahan'ny olon-dehibe mivoaka. Ny olon-dehibe dia nomena vahaolana sucrose 10% ad libitum hatramin'ny 4 andro aorian'ny fivoahany (dpe), izay fotoana izay dia natolotra sakafo avy hatrany talohan'ny fanandramana ny vavy mitady mpampiantrano, na nomena rano voadio nandritra ny alina talohan'ny fanandramana, araka ny voalaza etsy ambany. Ny vavy nampiasaina tamin'ny fanandramana fantsona sidina dia nomena sakafo nandritra ny 4-6 ora monja. miaraka amin'ny rano ad libitum. Mba hanomanana ny moka mitsentsitra ra ho an'ny bioassay manaraka, dia nomena ran'ondry tsy misy fibra (Håtunalab, Bro, SE) ny vavy dpe 4 tamin'ny fampiasana rafitra famahanana membrane (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK). Avy eo dia nafindra tany amin'ny tranom-borona tsirairay ireo vavy feno tanteraka ary nomena sakafo mivantana, araka ny voalaza etsy ambany, na sucrose 10% ad libitum nandritra ny 3 andro talohan'ny fanandramana voalaza etsy ambany. Ireo vavy farany dia nampiasaina ho an'ny bioassay amin'ny fantsona sidina ary nafindra tany amin'ny laboratoara, ary avy eo dia nosotroina rano madio ad libitum nandritra ny 4-6 ora talohan'ny fanandramana.
Nampiasaina handrefesana ny fihinanana urine sy urea amin'ny vavy Arabo An-dehibe ny fitiliana sakafo. Nomena sakafo misy urine ombivavy vaovao sy efa antitra voatsatso 1%, urea isan-karazany, ary fanaraha-maso roa (10% sucrose sy rano) nandritra ny 48 ora ny vavy mitady mpampiantrano sy nihinana ra. Ho fanampin'izany, nampiana tamin'ny sakafo ny fandokoana sakafo (1 mg ml-1 xylene cyanide FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) ary nomena tao anaty matrix 4 × 4 tao anaty fantsona microcentrifuge 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, Etazonia; Sary 1A) Fenoy hatramin'ny sisiny (~300 µl). Mba hisorohana ny fifaninanana eo amin'ny moka sy ny mety ho fiantraikan'ny lokon'ny fandokoana, apetraho ao anaty lovia Petri lehibe (12 sm ny savaivony ary 6 sm ny haavony; Semadeni, Ostermundigen, CH; Sary 1A) ny moka 10 ao anaty haizina tanteraka amin'ny 25 ± 2 sm °C sy 65 ± 5% ny hamandoana. Ireo andrana ireo naverina in-5 ka hatramin'ny in-10. Rehefa avy nihinana sakafo ny moka dia napetraka tamin'ny -20 °C mandra-panaovana fanadihadiana fanampiny.
Tadiavo ny urine omby sy ny urea voarain'ny Anopheles arabianus vavy mpampiantrano sy mpitsentsitra ra. Nandritra ny fitsapana famahanana (A), ny moka vavy dia nomena sakafo misy urine omby vaovao sy efa antitra, fifantohana urea isan-karazany, sucrose (10%), ary rano voadio (H2O). Ny moka vavy mitady host (B) sy ny moka vavy omena ra (C) dia nandray sucrose betsaka kokoa noho ny sakafo hafa nosedraina. Mariho fa ny moka vavy mitady host dia nandray urine omby 72 ora latsaky ny urine omby 168 ora (B). Ny salan'isa azota manontolo (± standard deviation) amin'ny urine dia aseho amin'ny inset. Ny moka vavy mitady host (D, F) sy ny moka vavy mitsentsitra ra (E, G) dia mandray urea amin'ny fomba miankina amin'ny fatra. Ny salan'isa volumes voafoka (D, E) miaraka amin'ny anarana litera samihafa dia samy hafa be amin'ny tsirairay (one-way ANOVA mampiasa ny fanadihadiana post hoc an'i Tukey; p < 0.05). Ny bara diso dia maneho ny hadisoana mahazatra amin'ny salan'isa (BE). Ny tsipika mahitsy tapaka dia maneho ny tsipika regression log-linear (F, G)
Mba hamoahana ny sakafo voatsindrona, dia napetraka tsirairay tao anaty fantsona microcentrifuge 1.5 ml misy rano voadio 230 µl ny moka ary nopotehina ny sela tamin'ny fampiasana fanoto azo ariana sy motera tsy misy tariby (VWR International, Lund, SE), narahin'ny centrifugation tamin'ny 10 krpm nandritra ny 10 minitra. Ny supernatant (200 µl) dia nafindra tao anaty microplate 96-well (Sigma-Aldrich) ary ny absorbance (λ620) dia voafaritra tamin'ny fampiasana mpamaky microplate mifototra amin'ny spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Na izany aza, dia nototoina tao anaty rano voadio 1 ml ny moka, 900 µl tamin'izany dia nafindra tao anaty cuvette ho an'ny fanadihadiana spectrophotometric (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Mba handrefesana ny fihinanana sakafo, dia nomanina tamin'ny alàlan'ny dilution serial ny fiolahana mahazatra mba hahazoana 0.2 µl hatramin'ny 2.4 µl amin'ny 1. mg ml-1 xylene cyanide. Avy eo, ny hakitroky optika amin'ny fifantohana loko fantatra dia nampiasaina mba hamaritana ny habetsaky ny sakafo lanin'ny moka tsirairay.
Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny fanadihadiana momba ny fiovaovan'ny fomba iray (ANOVA) ny angon-drakitra momba ny habetsahana, arahin'ny fampitahana mpivady nataon'i Tukey taorian'ny fanadihadiana (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, Etazonia, 1989–2007). Ny fanadihadiana momba ny regression linear dia namaritra ny fihinanana urea miankina amin'ny fifantohana ary nampitaha ny fihetsika teo amin'ny moka mitady mpampiantrano sy ny moka mitsentsitra ra (GraphPad Prism v8.0.0 ho an'ny Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, Etazonia).
Nofatorana tamin'ny Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ny santionan'ny urine eo amin'ny 20 µl eo ho eo avy amin'ny sokajin-taona tsirairay ary nofonosina tao anaty kapsily vy (8 mm × 5 mm). Nampidirina tao amin'ny efitrano fandoroana ny CHNS/O analyzer (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, Etazonia) ny kapsily mba hamaritana ny votoatin'ny azota ao amin'ny urine vaovao sy efa antitra araka ny protocole-n'ny mpanamboatra. Ny totalin'ny azota (g N l-1) dia nokajiana mifototra amin'ny fifantohana urea fantatra ampiasaina ho fenitra.
Mba hanombanana ny fiantraikan'ny sakafo amin'ny fahaveloman'ny vehivavy mitady mpampiantrano sy mitsentsitra ra, dia napetraka tsirairay tao anaty lovia Petri lehibe (12 sm ny savaivony ary 6 sm ny haavony; Semadeni) ny moka miaraka amin'ny lavaka voarakotra harato eo amin'ny sarony (3 sm ny savaivony) miaraka amin'ny fampidirana rivotra sy famatsiana sakafo. Nomena avy hatrany taorian'ny 4 dpe ny sakafo ary nahitana urine omby vaovao sy efa antitra natsonika 1%, urea efatra fifantohana, ary fanaraha-maso roa, sucrose 10% ary rano. Ny sakafo tsirairay dia natsoboka tao anaty tampon-nify (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) nampidirina tao anaty syringe 5 ml (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), nesorina ny plunger, ary napetraka teo ambonin'ny lovia petri (sary 1).1A). Ovay isan'andro ny sakafonao. Tazomy ny laboratoara araka ny voalaza etsy ambony. Nisaina indroa isan'andro ny moka velona, ​​raha nariana kosa ny moka maty mandra-pahafatin'ny moka farany (n = 40 isaky ny fitsaboana). Ny fahaveloman'ny moka nomena sakafo isan-karazany dia nodinihina ara-statistika tamin'ny fampiasana ny fiolahana fahaveloman'i Kaplan-Meyer ary fitsapana log-rank mba hampitahana ny fampitahana ny fizarana fahavelomana eo amin'ireo sakafo (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Fikosoham-bary manidina moka namboarina manokana mifototra amin'i Attisano et al.[17], vita amin'ny takelaka akrilika mazava 5 mm matevina (10 sm ny sakany x 10 sm ny lavany x 10 sm ny haavony) tsy misy takelaka eo anoloana sy aoriana (Sary 3: ambony). Fivoriana mihodina misy fantsona mitsangana vita amin'ny tsanganana chromatography gazy (0.25 mm id; 7.5 sm L) miaraka amin'ny tendrony miraikitra amin'ny fanjaitra bibikely mihantona eo anelanelan'ny andriamby neodymium roa izay 9 sm ny elanelany. Fantsona mitsivalana vita amin'ny fitaovana mitovy (6.5 sm L) no nanasaraka ny fantsona mitsangana mba hamorona sandry mifamatotra sy sandry izay mitondra sombin-taratasy aluminium kely ho famantarana manapaka ny hazavana.
Nomena sakafo voalaza etsy ambony nandritra ny 30 minitra ireo moka vavy izay tsy noana nandritra ny 24 ora talohan'ny nametrahana azy ireo. Avy eo dia nofanaina tsirairay teo ambony ranomandry nandritra ny 2-3 minitra ireo moka vavy izay efa nohanina tsara ary nafatotra tamin'ny tsindron'ny bibikely tamin'ny savoka tantely (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) ary avy eo dia nafatotra tamin'ny sandrin'ny fantsona mitsivalana. Flying Mill. Noraketina tamin'ny alalan'ny fitaovana fanangonana angona namboarina manokana ny fihodinana isaky ny sidina, avy eo notehirizina sy naseho tamin'ny fampiasana rindrambaiko PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Napetraka tao amin'ny efitrano voafehy ny toetrandro (12 ora:12 ora, mazava: maizina, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH) ny milina fanidina.
Mba hijerena ny lamina amin'ny sidina, dia nokajiana isan'ora nandritra ny 24 ora ny halavirana rehetra nalehan'ny sidina (m) sy ny isan'ny sidina nifanesy. Ankoatra izany, dia nampitahaina tamin'ny fitsaboana rehetra ny halavirana antonony nalehan'ny vehivavy tsirairay ary nohadihadiana tamin'ny fampiasana ANOVA tokana sy ny fanadihadiana post hoc an'i Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.), izay noheverina ho fiovaovan'ny fiankinan-doha ny halavirana antonony, raha toa kosa ny fitsaboana ka anton-javatra tsy miankina. Fanampin'izany, dia kajy isaky ny 10 minitra ny salan'isan'ny fihodinana.
Mba hanombanana ny fiantraikan'ny sakafo amin'ny fahombiazan'ny fananahan'ny An.arabiensis, dia nafindra mivantana tao amin'ny tranom-borona Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm) ny vavy enina (4 dpe) taorian'ny fakana ra ary avy eo dia nomena ny sakafo fanandramana nandritra ny 48 ora araka ny voalaza etsy ambony. Avy eo dia nesorina ny sakafo ary nomena kaopy fanatodizana (30 ml; Nolato Hertila) feno rano voadio 20 ml tamin'ny andro fahatelo nandritra ny 48 ora, novaina isaky ny 24 ora. Avereno in-20-50 ny fomba fisakafoanana tsirairay. Noisaina sy noraketina ny atody ho an'ny tranom-borona fanandramana tsirairay. Nampiasaina hanombanana ny salan'isa haben'ny atody sy ny halavany (n ≥ 200 isaky ny sakafo) ny santionan'ny atody tsirairay tamin'ny fampiasana mikroskopia Dialux-20 (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) misy fakantsary Leica (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE). Ireo atody sisa tavela dia notehirizina tao amin'ny efitrano voafehy ny mari-pana teo ambanin'ny fepetra fiompiana mahazatra nandritra ny 24 ora, ary norefesina ny santionany tamin'ireo olitra vao nipoitra voalohany (n ≥ 200 isaky ny sakafo), araka ny voalaza etsy ambony. Ny isan'ny atody sy ny haben'ny atody sy ny olitra dia nampitahaina teo amin'ireo fitsaboana ary nampiasa ANOVA tokana sy fanadihadiana post hoc an'i Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Nangonina avy amin'ny santionan'ny omby Zebu, karazana Arsi ny ranoka avy amin'ny headspace, izay vao avy nojerena (1 ora aorian'ny fakana santionany), 24 ora, 72 ora ary 168 ora. Ho fanamorana, nangonina vao maraina ny santionan'ny ranoka raha mbola tao an-trano fitehirizam-bokatra ny omby. Nangonina avy amin'ny omby 10 ny santionan'ny ranoka ary nafindra tao anaty kitapo fanaova-mofo polyamide tsirairay (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) tao anaty polyamide 3 litatra misy sarony tao anaty barika plastika vinyl chloride. Nangonina mivantana (vaovao) na rehefa avy nohamafisina tamin'ny mari-pana ao an-trano mandritra ny 24 ora, 72 ora ary 168 ora ny ranoka avy amin'ny santionan'ny ranoka tsirairay, izany hoe ny santionan'ny ranoka tsirairay dia maneho ny sokajin-taona tsirairay.
Ho an'ny fanangonana ireo singa mivaingana ao amin'ny headspace, dia nampiasaina ny rafitra mihidy mba hampivezivezena ny entona voasivana amin'ny karbônina mavitrika (100 ml min-1) amin'ny alalan'ny kitapo polyamide mankany amin'ny tsanganana adsorption mandritra ny 2.5 ora amin'ny fampiasana paompy banga diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE). Ho fanaraha-maso, dia natao avy amin'ny kitapo polyamide foana ny fanangonana ny singa mivaingana ao amin'ny headspace. Ny tsanganana adsorption dia vita amin'ny fantsona Teflon (5.5 cm x 3 mm id) misy 35 mg ny Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) eo anelanelan'ny plugs glass wool. Alohan'ny hampiasana azy, dia nosasana tamin'ny n-hexane 1 ml (Merck, Darmstadt, DE) sy pentane 1 ml (99.0% solvent madio GC grade, Sigma Aldrich) ny tsanganana. Ny singa mivaingana adsorbed dia nodiovina tamin'ny pentane 400 μl. Ny fanangonana ny singa mivaingana ao amin'ny headspace dia nangonina ary avy eo notehirizina tamin'ny -20°C mandra-pampiasaina amin'ny fanadihadiana fanampiny.
Ny fihetsiky ny An., izay mitady mpampiantrano sy mihinana ra. Ny fitrandrahana volatile Headspace nangonina avy amin'ny urine vaovao, 24 ora, 72 ora, ary 168 ora dia nodinihina mba hahitana fitrandrahana volatile avy amin'ny moka Arabidopsis amin'ny fampiasana olfactometer fantsona fitaratra mahitsy [18]. Natao nandritra ny ZT 13-15 ny fanandramana, izay vanim-potoana fara tampon'ny fikarohana trano nataon'i An. Arab [19]. Ny olfactometer fantsona fitaratra (80 cm × 9.5 cm id) dia nohazavaina tamin'ny jiro mena 3 ± 1 lx avy any ambony. Ny fikorianan'ny rivotra voasivana sy nolemana tamin'ny arina (25 ± 2 °C, 65 ± 2% ny hamandoana) dia nandalo ny bioassay tamin'ny 30 cm s-1. Ny rivotra dia alefa amin'ny alàlan'ny andiana harato vy tsy misy harafesina, mamorona fikorianan'ny laminar sy rafitra plume mitovy. Ny mpizara tampon-nify (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), mihantona amin'ny coil 5 cm eo amin'ny faran'ny olfactometer, miaraka amin'ny fanovana stimulator isaky ny 5 minitra. Ho an'ny fanadihadiana, 10 μl amin'ny nalaina avy amin'ny headspace tsirairay, nohafohezina 1:10, no nampiasaina ho stimulus. Pentane mitovy habe no nampiasaina ho fanaraha-maso. Napetraka tao anaty tranom-borona famoahana tsirairay ireo moka mitady mpampiantrano na mitsentsitra ra 2-3 ora talohan'ny nanombohan'ny fanandramana. Napetraka teo amin'ny ilany midina amin'ny olfactometer ny tranom-borona famoahana, ary navela hifanaraka mandritra ny 1 minitra ireo moka, ary avy eo dia nosokafana ny valva lolo ao amin'ny tranom-borona mba hamoahana azy. Nohadihadiana ny fisarihana ny fitsaboana na ny fanaraha-maso ho toy ny isan-jaton'ny moka izay nifandray tamin'ny loharano tao anatin'ny 5 minitra taorian'ny famoahana azy. Ny nalaina avy amin'ny headspace volatile sy ny fanaraha-maso tsirairay dia naverina in-30 farafahakeliny, ary mba hisorohana ny vokatry ny andro iray, dia nosedraina ny isan'ny fitsaboana sy ny fanaraha-maso mitovy isaky ny andro fanandramana. Mitadiava valiny avy amin'ny mpampiantrano sy ny olona omena ra. Ny andiana Arabo mifanohitra amin'ny headspace dia nohadihadiana tamin'ny alàlan'ny regression logistic nominal arahin'ny fampitahana tsiroaroa ho an'ny tahan'ny hafahafa (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Fihetseham-pon'i An amin'ny fanatodizan'ny omby. Nohadihadiana tao anaty tranom-borona Bugdorm (30 cm × 30 cm × 30 cm; MegaView Science) ny nalaina avy amin'ny fisotron'omby vaovao sy efa antitra. Kaopy plastika (30 mL; Nolato Hertila) feno rano voadio 20 mL no nanome ny fototra fanatodizan'ny omby ary napetraka teo amin'ny zorony mifanohitra amin'ny tranom-borona, 24 cm ny elanelany. Nohavaozina tamin'ny 10 μl amin'ny nalaina avy amin'ny fisotron'omby tsirairay tamin'ny tahan'ny 1:10 ny kaopy fitsaboana. Nampiasaina mitovy ny pentane mba hanitsiana ny kaopy fanaraha-maso. Nifanakalozana kaopy fitsaboana sy fanaraha-maso teo anelanelan'ny fanandramana tsirairay mba hijerena ny fiantraikan'ny toerana. Navoaka tao anaty tranom-borona fanandramana ny vavy folo nohanina ra tamin'ny ZT 9-11 ary nisaina ny atody tao anaty kaopy 24 ora taty aoriana. Ny raikipohy hikajiana ny tondro fanatodizan'ny omby dia: (ny isan'ny atody napetraka tao anaty kaopy fitsaboana - ny isan'ny atody napetraka tao anaty kaopy fanaraha-maso)/(ny isan'ny atody napetraka manontolo). Naverina in-8 ny fitsaboana tsirairay.
Natao araka ny voalaza teo aloha [20] ny fanadihadiana momba ny chromatography gazy sy ny famakafakana ny lamina antenne elektrôna (GC-EAD) an'ny An.arabiensis vavy. Raha fintinina, ireo fitrandrahana volatile headspace vaovao dia nosarahina tamin'ny fampiasana Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, Etazonia) misy tsanganana HP-5 (30 m × 0.25 mm id, hatevin'ny sarimihetsika 0.25 μm, Agilent Technologies). ary ny urine efa antitra. Nampiasaina ho dingana finday ny hidrôzenina miaraka amin'ny tahan'ny fikorianan'ny rano antonony 45 cm s-1. Ny santionany tsirairay (2 μl) dia nampidirina nandritra ny 30 segondra tamin'ny fomba splitless miaraka amin'ny mari-pana fidirana 225 °C. Ny mari-pana ao amin'ny lafaoro GC dia nomanina avy amin'ny 35 °C (fihazonana 3 minitra) ka hatramin'ny 300 °C (fihazonana 10 minitra) amin'ny 10 °C min-1. Tao amin'ny splitter GC effluent, dia nampiana azota 4 psi ary nozaraina 1:1 tao anaty Gerstel 3D/2 low dead volume cross (Gerstel, Mülheim, DE) teo anelanelan'ny detector ionization lelafo sy ny EAD. Ny kapilary GC effluent ho an'ny EAD dia nampandalovina tamin'ny alàlan'ny tsipika famindrana Gerstel ODP-2, izay manara-maso ny mari-pana ao amin'ny lafaoro GC miampy 5 °C, ao anaty fantsona fitaratra (10 cm × 8 mm), izay nafangaro tamin'ny rivotra mando sy voasivana karbônina (1.5 l min−1). Napetraka ny antenne 0.5 sm miala ny fivoahan'ny fantsona. Ny moka tsirairay dia nahazo dika mitovy iray, ary ho an'ny moka mitady mpampiantrano, farafahakeliny dika mitovy telo no natao tamin'ny santionan'ny urine isaky ny taona.
Famantarana ireo akora bioaktiva ao amin'ny fanangonana urine vaovao sy efa antitra ao amin'ny headspace amin'ny alàlan'ny fampiasana GC sy spectrometer mass (GC-MS; 6890 GC sy 5975 MS; Agilent Technologies) mba hahazoana valinteny antennal amin'ny fanadihadiana GC-EAD, miasa amin'ny fomba ionization fiantraikan'ny elektrôna amin'ny 70 eV. Ny GC dia nasiana tsanganana kapila silica fused HP-5MS UI (60 m × 0.25 mm ny savaivony anatiny, hatevin'ny sarimihetsika 0.25 μm) mampiasa hélium ho dingana finday miaraka amin'ny tahan'ny fikorianan'ny linear antonony 35 cm s-1. Santionany 2 μl no nampidirina tamin'ny fampiasana ny fikirana injector sy ny mari-pana lafaoro mitovy amin'ny fanadihadiana GC-EAD. Ny akora dia fantatra mifototra amin'ny fotoana fitazonana azy ireo (Kovát index) sy ny spectra mass raha oharina amin'ny tranomboky manokana sy ny tranomboky NIST14 (Agilent). Ny akora fantatra dia nohamafisina tamin'ny fampidirana fenitra tena izy (Rakitra fanampiny 1: Tabilao S2). Ho an'ny fandrefesana, heptyl acetate (10 ng, fahadiovana simika 99.8%, Aldrich) dia nampidirina ho fenitra ivelany.
Fanombanana ny fahombiazan'ny fangaro fofona sentetika misy akora bioactive hita ao amin'ny urine vaovao sy efa antitra mba hisarihana ny Ans.arabiensis mitady mpampiantrano sy mpitsentsitra ra, amin'ny fampiasana ny olfactometer sy ny protocole mitovy amin'ny etsy ambony. Ny fangaro sentetika dia naka tahaka ny firafitry ny akora sy ny ampahany amin'ny akora ao anaty headspace mifangaro amin'ny urine vaovao, efa antitra 24 ora, 48 ora, 72 ora, ary 168 ora (Sary 5D-G; Rakitra fanampiny 1: Tabilao S2). Ho an'ny fanadihadiana, ampiasao 10 μl amin'ny dilution 1:100 amin'ny fangaro sentetika tanteraka, miaraka amin'ny tahan'ny famoahana ankapobeny eo anelanelan'ny 140-2400 ng h-1 eo ho eo, mba hanombanana ny maha-sarika ny mpampiantrano sy ny moka mpitsentsitra ra. Aorian'izay, ny fitsapana dia atao amin'ny fangaro feno, izay anesorana ny fangaro subtractive amin'ny fangaro tokana amin'ny fangaro feno. Mitadiava valiny avy amin'ny mpampiantrano sy ny Ans. Ny fangaro Arabo vs sentetika sy subtractive dia nodinihina tamin'ny fampiasana regression logistic nominal arahin'ny fampitahana tsiroaroa ho an'ny tahan'ny hafahafa. (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Mba hanombanana raha toa ka mety ho toerana fonenan'ny moka ho an'ny tazomoka ny amanin'omby, dia nalaina araka ny voalaza etsy ambony ny amanin'omby vaovao sy efa antitra ary napetraka tao anaty siny 3 litatra (100 ml) ary napetraka tao anaty fandrika fandrika ho an'ny mpampiantrano. (BG-HDT version; BioGents, Regensburg, DE). Fandrika folo napetraka 50 m ny elanelany tao anaty kijana, 400 m miala ny vondrom-piarahamonina ao an-tanàna (Silay, Etiopia, 5°53´24´´N, 37°29´24´´E) ary tsy nisy omby, tao amin'ny toeram-piompiana maharitra sy tanàna kely. Fandrika dimy no nafanaina mba hanahafana ny fisian'ny mpampiantrano iray, raha fandrika dimy kosa no navela tsy nafanaina. Ny toerana fitsaboana tsirairay dia avadika isan'alina mandritra ny dimy alina. Ny isan'ny moka voasambotra tao anaty fandrika nasiana amanin'omby tamin'ny taona samihafa dia nampitahaina tamin'ny fampiasana regression logistique miaraka amin'ny beta binomial distribution (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Tao amin'ny tanàna kely iray izay ahitana tazomoka be dia be akaikin'ny tanànan'i Maki, faritr'i Oromia, Etiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Sary 6A). Natao teo anelanelan'ny tapaky ny volana Aogositra sy tapaky ny volana Septambra ny fanadihadiana talohan'ny famafazana fanafody sisa tavela isan-taona ao an-trano, miaraka amin'ny vanim-potoanan'ny orana lava. Trano dimy tsiroaroa (20–50 m ny elanelany) any amin'ny sisin'ny tanàna no nofantenana ho an'ny fanadihadiana (Sary 6A). Ireto avy ny fepetra nampiasaina hisafidianana ny trano: tsy mahazo miditra ao an-trano ny biby, tsy mahazo mahandro sakafo ao an-trano (maka kitay na arina) (farafaharatsiny mandritra ny fotoam-pitsapana), ary trano misy mponina roa farafahabetsany, matory amin'ny fanafody famonoana bibikely. eo ambanin'ny lay moka efa voatsabo. Ny Birao Mpandinika ny Etika momba ny Fikarohana ao amin'ny Institutional Research (IRB/022/2016) ao amin'ny Faculty of Natural Sciences (CNS-IRB), Addis Ababa University no nanome fankatoavana ara-etika, mifanaraka amin'ny torolàlana napetraky ny Fanambarana nataon'ny Fikambanana Iraisam-pirenena Momba ny Fitsaboana ao Helsinki. Ny fanekena avy amin'ny lohan'ny tokantrano tsirairay dia azo tamin'ny fanampian'ny mpiasan'ny fanitarana ny fahasalamana. Ny dingana manontolo dia tohanan'ny fitantanana eo an-toerana amin'ny ambaratonga distrika sy paroasy ('kebele'). Ny endrika fanandramana dia nanaraka endrika efamira Latina 2 × 2, izay nametrahana fangaro sy fanaraha-maso sentetika tamin'ny trano roa sosona tamin'ny alina voalohany ary nifanakalozana teo amin'ny trano tamin'ny alina fanandramana manaraka. Naverina im-polo ity dingana ity. Fanampin'izany, mba hanombanana ny asan'ny moka ao amin'ny trano voafantina, ny fandrika CDC dia napetraka hiasa dimy alina misesy amin'ny fiandohana, afovoany ary faran'ny fitsapana eny an-tsaha amin'ny fotoana iray ihany amin'ny andro.
Nisy fangaro simika misy akora bioactive enina nolevonina tao anaty heptane (97.0% solvent GC grade, Sigma Aldrich) ary navoaka tamin'ny 140 ng h-1 tamin'ny fampiasana dispenser wick landihazo [20]. Ny dispenser wick dia namela ny famoahana ireo akora rehetra amin'ny ampahany tsy miova nandritra ny fanandramana 12 ora. Ny heptane dia nampiasaina ho fanaraha-maso. Ny tavoahangy kely dia nahantona teo akaikin'ny toerana fidiran'ny fandrika maivana an'ny Centers for Disease Control and Prevention (CDC) (John W. Hock Company, Gainesville, FL, Etazonia; Sary 6A). Ny fandrika dia nahantona 0.8 - 1 m ambonin'ny tany, akaikin'ny fotony fandriana, ary ny mpilatsaka an-tsitrapo iray dia natory teo ambanin'ny lay moka tsy voatsabo ary niasa teo anelanelan'ny 18:00 sy 06:30. Ny moka voasambotra araka ny maha-lahy na maha-vavy sy ny toetry ny vatana (tsy nihinana, nihinana, bevohoka antsasany, ary bevohoka [21] dia nojerena avy eo tamin'ny alàlan'ny fanadihadiana polymerase chain reaction (PCR) mba hamantarana ny karazana fantatra ara-morfolojika ho A. gambiae sl. Mpikambana ao amin'ny complexe [23]. Tany an-tsaha Tao anatin'ny fandalinana, ny fandrika fandrika amin'ny trano mifanambatra dia nodinihina tamin'ny fampiasana modely mifanaraka amin'ny logistika, izay ny fisarihana no variable miankina ary ny fitsaboana (fangaro sentetika vs fanaraha-maso) no vokatra raikitra (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.). Eto izahay dia mitatitra ny χ2 sy ny p-values ​​​​avy amin'ny fitsapana tahan'ny mety.
Tombano raha azo antoka izany. Afaka nahazo urine, loharanon'ny azota lehibe indrindra, urea, ny arabiensis tamin'ny alalan'ny famahanana mivantana, tao anatin'ny 48 ora taorian'ny fampiasana azy nandritra ny 4 andro taorian'ny fitsapana (dpe) momba ny fitadiavana mpampiantrano sy ny famahanana ra ho an'ny vehivavy (Sary 1A). Samy nandray sucrose betsaka kokoa noho ny sakafo na rano hafa rehetra ny vehivavy mitady mpampiantrano sy ny vehivavy mitsentsitra ra (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 ary F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, tsirairay avy; Sary 1B,C). Ankoatra izany, ny vehivavy mitady mpampiantrano dia nihinana kely kokoa tao anaty urine tao anatin'ny 72 ora raha oharina amin'ny urine tao anatin'ny 168 ora (Sary 1B). Rehefa natolotra sakafo misy urea, ny vehivavy mitady mpampiantrano dia nandray urea betsaka kokoa tamin'ny 2.69 mM raha oharina amin'ny fifantohana sy rano hafa rehetra, raha tsy azo avahana amin'ny sucrose 10% (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Sary 1D). Mifanohitra amin'ny fihetsiky ny vehivavy nihinana ra izany, izay mazàna mandray sakafo misy urea betsaka kokoa noho ny rano, na dia latsaky ny 10% aza ny sucrose (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Sary 1).1E). Ankoatra izany, rehefa ampitahaina ireo toe-batana roa ireo, ny vehivavy phlebotomy dia mandray urea betsaka kokoa noho ny vehivavy mitady host amin'ny fifantohana ambany indrindra, ary ireo vehivavy ireo dia mandray urea mitovy amin'izany amin'ny fifantohana ambony kokoa (F(1,953)= 78.82, p < 0.0001; Sary 1F, G). Na dia toa nanana ny sanda tsara indrindra aza ny fihinanana sakafo misy urea (Sary 1D, E), ny vehivavy amin'ireo toe-batana roa ireo dia afaka manova ny habetsaky ny urea voaray manerana ny fifantohana urea manontolo amin'ny fomba log-linear (Sary 1F, G). Toy izany koa, toa mifehy ny fidiran'ny azota ao amin'ny urine ny moka amin'ny alàlan'ny fandrindrana ny habetsahan'ny azota miditra ao amin'ny urine, satria ny habetsahan'ny azota ao amin'ny urine dia hita taratra amin'ny habetsahana miditra ao amin'ny urine (Sary 1B, C sy B).
Mba hanombanana ny fiantraikan'ny urine sy ny urea amin'ny fahaveloman'ny moka mitady mpampiantrano sy mitsentsitra ra, dia nomena urine avy amin'ny sokajin-taona rehetra (vaovao, 24 ora, 72 ora, ary 168 ora aorian'ny fametrahana) ny vavy ary karazana fifantohana urea, ary koa rano voadio sy siramamy 10% no nampiasaina ho fanaraha-maso (Sary 2A). Ity fanadihadiana momba ny fahavelomana ity dia naneho fa ny sakafo dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny fahaveloman'ny vavy mitady mpampiantrano (urine: χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Sary 2B, C) sy ny vavy mihinana ra (urine: χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Sary 2D, E). Amin'ny ankapobeny Tamin'ny andrana natao, ireo vehivavy nihinana urine, urea, ary rano dia nanana taham-pahavelomana ambany kokoa raha oharina amin'ireo vehivavy nihinana sakafo sucrose (Sary 2B-E). Ireo vehivavy nitady mpampiantrano izay nihinana urine vaovao sy efa antitra dia naneho taham-pahavelomana samihafa, ary ireo izay nihinana urine efa antitra nandritra ny 72 ora (p = 0.016) no nanana ny mety ho fahavelomana ambany indrindra (Sary 2B). Ankoatra izany, ireo vehivavy nitady mpampiantrano izay nihinana urea 135 mM dia velona ela kokoa noho ireo vehivavy tsy nihinana rano (p < 0.04) (Sary 2C). Raha ampitahaina amin'ny rano, ireo vehivavy nihinana urine vaovao sy urine 24 ora dia velona ela kokoa (p = 0.001 sy p = 0.012, tsirairay avy; Sary 2D), raha ireo vehivavy nihinana urine 72 ora kosa dia velona ela kokoa noho ireo vehivavy nihinana urine fohy sy urine efa antitra nandritra ny 24 ora (p < 0.0001 sy p = 0.013, tsirairay avy; Sary 2D). Rehefa nihinana urea 135 mM, ireo vehivavy nihinana ra dia velona ela kokoa noho ireo vehivavy nihinana urea sy rano hafa rehetra (p < 0.013; Sary 2E).
Ny fahaveloman'ny moka vavy Anopheles arabinis mpampiantrano sy mpitsentsitra ra mihinana amanin'omby sy urea. Tao amin'ny bioassay (A), dia nomena sakafo misy amanin'omby vaovao sy efa antitra, urea isan-karazany, sucrose (10%) ary rano voadio (H2O) ny moka vavy. Noraisina isaky ny 12 ora ny fahaveloman'ny moka mpampiantrano (B, C) sy mpitsentsitra ra (D, E) mandra-pahafatin'ny vavy rehetra mihinana amanin'omby (B, D) sy urea (C, E), ary ny moka fanaraha-maso, Sucrose sy rano.
Samy hafa ny halavirana sy ny isan'ny bala voafaritra nandritra ny fitsapana tao amin'ny milina fanidinana nandritra ny 24 ora, teo amin'ireo moka mitady mpampiantrano sy ireo moka mitsentsitra ra, izay naneho fihetsika fanidinana kely kokoa amin'ny ankapobeny (Sary 3). Ireo moka mitady mpampiantrano izay manome urine vaovao sy efa antitra na siramamy sy rano dia naneho lamina fanidinana miavaka (Sary 3), miaraka amin'ireo moka vavy mihinana urine vaovao izay mavitrika kokoa amin'ny maraina, raha ireo moka efa antitra 24 sy 168 ora kosa. Ireo moka nihinana urine dia naneho lamina fanidinana samihafa ary matetika dia miasa antoandro. Ireo moka vavy izay nanome urine siramamy na 72 ora dia naneho fihetsika nandritra ny 24 ora, raha ireo moka vavy kosa nanome rano dia mavitrika kokoa nandritra ny tapany afovoan'ny vanim-potoana. Ireo moka nihinana siramamy no naneho fihetsika ambony indrindra tamin'ny alina be sy ny maraina be, raha ireo moka nihinana urine efa antitra 72 ora kosa dia nihena hatrany ny fihetsika nandritra ny 24 ora (Sary 3).
Fahombiazan'ny sidin'ny moka vavy Anopheles arabinis mpihaza izay mihinana amanin'omby sy urea. Tao amin'ny fitsapana tao amin'ny orinasa fanidinana, ireo moka vavy izay nihinana amanin'omby vaovao sy efa antitra, urea isan-karazany, siramamy (10%), ary rano voadio (H2O) dia nafatotra tamin'ny sandry mitsivalana sy mihodina malalaka (etsy ambony). Ho an'ny moka vavy mitady mpampiantrano (ankavia) sy mpitsentsitra ra (ankavanana), ny halavirana manontolo sy ny isan'ny sidina isan'ora ho an'ny sakafo tsirairay mandritra ny 24 ora dia voarakitra (maizina: volondavenona; mazava: fotsy). Ny halavirana antonony sy ny isan'ny fifandonana antonony dia aseho eo ankavanan'ny grafika momba ny asa circadian. Ny bara diso dia maneho ny hadisoana mahazatra amin'ny salan'isa. Ny fanadihadiana statistika dia jereo ny lahatsoratra.
Amin'ny ankapobeny, ny asan'ny moka vavy mitady mpampiantrano amin'ny ankapobeny dia nanaraka lamina mitovy amin'ny halaviran'ny sidina mandritra ny 24 ora. Ny halaviran'ny sidina antonony dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny sakafo nohanina (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), ary ny moka vavy mitady mpampiantrano nihinana urine 72 ora dia nanidina lavitra kokoa raha oharina amin'ny sakafo hafa rehetra (p < 0.0001), ary ny moka nomena sucrose dia nanidina lava kokoa noho ny moka vaovao (p = 0.022) sy ny moka nomena urine efa ela (p = 0.022). Mifanohitra amin'ny lamina asan'ny sidina voalaza ao amin'ny sakafo amin'ny urine, ny moka vavy mitady mpampiantrano nomena urea dia naneho asan'ny sidina maharitra nandritra ny 24 ora, izay nahatratra ny fara tampony nandritra ny tapany faharoa amin'ny dingana maizina (Sary 3). Na dia mitovy aza ny lamina asan'ny moka, ny moka vavy mitady mpampiantrano nomena urea dia nitombo be ny halaviran'ny sidina antonony arakaraka ny fifantohana voaray (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001). Ny asan'ny moka dia Ireo vavy nomena urea izay nitombo be dia be dia nanidina ela kokoa noho ireo vavy nomena rano na siramamy (p < 0.03).
Ny fiasan'ny moka mpitsentsitra ra amin'ny ankapobeny dia tsy niova ary naharitra nandritra ny 24 ora tamin'ny sakafo rehetra, niaraka tamin'ny fitomboan'ny fiasan'ny urine nandritra ny tapany faharoa tamin'ny vanim-potoana maizina ho an'ny vavy nihinana rano ary koa tamin'ny vavy nihinana vaovao sy 24 ora (sary 3). Na dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny halaviran'ny sidina antonony aza ny sakafon'ny urine tamin'ny vavy nihinana ra (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), ny sakafo urea kosa dia tsy nisy fiantraikany (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) tamin'ny sakafo hafa momba ny urine sy ny sakafo fanaraha-maso (vaovao, p = 0.0091; 72 ora, p = 0.0022; 168 ora, p = 0.001; sucrose, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Nodinihina tamin'ny alalan'ny fitiliana bioassay (Sary 4A) ny fiantraikan'ny fihinanana urine sy urea amin'ny masontsivana fananahana ary nodinihina araka ny isan'ny atody napetraky ny vavy tsirairay, ny haben'ny atody, ary ny olitra vao foy. Ny isan'ny atody napetraka. Niovaova arakaraka ny sakafo ny vavy Arabo nomena urine (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Sary 4B). Ny vavy nomena urine sy ra nandritra ny 24 ora dia nametraka atody betsaka kokoa noho ny vavy nomena sakafo urine hafa ary mitovy amin'ireo nomena sucrose (Sary 4B). Toy izany koa, ny haben'ny atody napetraky ny vavy nomena urine dia niovaova arakaraka ny sakafo (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), miaraka amin'ny urine nandritra ny 24 ora sy ny vavy nomena sucrose mametraka atody lehibe kokoa noho ny vavy nomena rano, raha kely kokoa kosa ny atodin'ny vavy nomena urine 168 ora (Sary 4C). Ankoatra izany, ny sakafo amin'ny urine dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny haben'ny olitra (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), miaraka amin'ny olitra lehibe kokoa mipoitra avy amin'ny atody napetraky ny vavy 24 sy 72 ora izay omena urine noho ny avy amin'ny atody. Ny vavy omena rano sy ny vavy omena urine mandritra ny 168 ora (Sary 4D).
Fahombiazan'ny fananahan'ny moka vavy Anopheles arabinis izay mihinana amanin'omby sy urea. Nomena sakafo misy amanin'omby vaovao sy efa antitra, urea isan-karazany, sucrose (10%), ary rano voadio (H2O) nandritra ny 48 ora ireo moka vavy nofantenana ra talohan'ny nametrahana azy ireo tao amin'ny bioassay sy ny fahazoana akora fanatodizana 48 ora (A). Ny isan'ny atody (B, E), ny haben'ny atody (C, F) ary ny haben'ny olitra (D, G) dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny sakafo nomena (amanin'omby: BD; urea: EG). Ny salan'isa ho an'ny masontsivana tsirairay norefesina tamin'ny fampiasana anarana litera samihafa dia samy hafa be amin'ny tsirairay (ANOVA tokana mampiasa ny fanadihadiana post hoc an'i Tukey; p < 0.05). Ny bara diso dia maneho ny fahadisoana mahazatra amin'ny salan'isa.
Amin'ny maha-singa azota lehibe indrindra ao amin'ny urine azy, ny urea, rehefa omena ho sakafo ho an'ny vavy mihinana ra, dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny mari-pamantarana fananahana tamin'ny fanadihadiana rehetra. Ny isan'ny atody napetraky ny vavy nihinana urea, taorian'ny fihinanana ra, miankina amin'ny fifantohana urea (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), ny vavy nihinana fifantohana urea teo anelanelan'ny 134 µM sy 1.34 mM dia nametraka atody bebe kokoa (Sary 4E). Ny vavy nihinana fifantohana urea 134 µM na mihoatra dia nametraka atody lehibe kokoa noho ny vavy nihinana rano (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Sary 4F), ary ny haben'ny olitra, na dia voakasiky ny fifantohana urea mitovy amin'ny reny aza (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001) dia miovaova kokoa (Sary 4G).
Ny hatsaran'ny moka amin'ny ankapobeny dia ny fitrandrahana ranoka avy amin'ny lohan'ny urine omby mitady mpampiantrano. Ny arabiensis nodinihina tao amin'ny olfactometer fantsona fitaratra (Sary 5A) dia voakasiky ny taonan'ny urine (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Sary 5B). Ny fanadihadiana post hoc dia naneho fa ny fofona urine efa levona ao anatin'ny 24 ora dia miteraka haavo ambony kokoa raha oharina amin'ny fitsaboana hafa rehetra (72 ora: p = 0.0060, 168 ora: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), afa-tsy ny fofon'ny urine vaovao (p = 0.13; Sary 5B). Na dia tsy dia nisy fahasamihafana firy aza ny fahasarika ny moka amin'ny fofona urine amin'ny ankapobeny (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Sary 5C), ireo moka vavy ireo dia hita fa manintona kokoa ny fitrandrahana ranoka avy amin'ny lohan'ny urine raha oharina amin'ny urine efa notehirizina 72 ora raha oharina amin'ny fanaraha-maso (p = 0.0066; Sary 5C).
Fihetsika manoloana ny fofona voajanahary sy sentetika amin'ny fisotron'omby amin'ny fikarohana ny Anopheles arabianus izay omena ra. Kisarisin'ny olfactometer amin'ny fantsona fitaratra (A). Fisarihana ny fitrandrahana mivaingana avy amin'ny fisotron'omby vaovao sy efa antitra amin'ny moka (B) sy ny moka mitsentsitra ra (C). Tadiavo ny fihetsiky ny Lord An. Aseho ny fitrandrahana avy amin'ny fisotron'omby vaovao (D), 24 ora (E), 72 ora (F), ary 168 ora (G). Ny dian'ny famantarana ny antenne elektrôna (EAD) dia mampiseho ny fiovan'ny voltazy ho setrin'ny akora bioactive ao amin'ny fisotron'omby nalaina avy amin'ny chromatograph gazy ary hitan'ny detector ionization flame (FID). Ny bara mizana dia maneho ny amplitude response (mV) mifanohitra amin'ny fotoana fitazonana (s). Aseho ny toetra sy ny tahan'ny famoahana (µg h-1) amin'ireo akora biolojika mavitrika. Ny kintana tokana (*) dia manondro ny fihetsika ambany amplitude tsy miovaova. Ny kintana roa (**) dia manondro ny fihetsika tsy azo averina. Tadiavo ny mpampiantrano (H) sy ny (I) An.arabiensis mpitsentsitra ra dia manana fomba fijery samihafa amin'ny fifangaroan'ny fofona manitra avy amin'ny amanin'omby vaovao sy efa antitra. Ny salan'isan'ny isan'ny moka voasarika amin'ny anaran'ny litera samihafa dia samy hafa be (ANOVA tokana mampiasa ny fanadihadiana post hoc an'i Tukey; p < 0.05). Ny bara diso dia maneho ny fahadisoana mahazatra amin'ny mizana.
Ny Ann.arabiensis vavy, 72 ora sy 120 ora taorian'ny fihinanana ra, nandritra ny fanatodizana, dia tsy nisy safidy naseho ho an'ny fitrandrahana volatile ao amin'ny headspace avy amin'ny amanin'omby vaovao sy efa antitra raha oharina amin'ny fanaraha-maso pentane (χ2 = 3.07, p > 0.05; Rakitra fanampiny 1: Sary S1).
Ho an'ny Ann.arabiensis vavy, ny fanadihadiana GC-EAD sy GC-MS dia namantatra akora bioactive valo, enina, telo ary telo (Sary 5D-G). Na dia hita aza ny fahasamihafana eo amin'ny isan'ny akora izay niteraka valinteny elektrofiziolojika, ny ankamaroan'ireo akora ireo dia hita tao amin'ny fitrandrahana volatile headspace tsirairay nalaina avy amin'ny urine vaovao sy efa antitra. Noho izany, ho an'ny fitrandrahana tsirairay, ireo akora izay niteraka valinteny ara-batana avy amin'ny antenne vavy ambonin'ny tokonam-baravarana ihany no nampidirina tamin'ny fanadihadiana fanampiny.
Nitombo avy amin'ny 29 µg h-1 tao anaty urine vaovao ho 242 µg h-1 tao anaty urine efa notehirizina 168 ora ny tahan'ny famoahana akora biolojika miovaova ao amin'ny fanangonana headspace, indrindra noho ny fitomboan'ny p-cresol sy m-formaldehyde. Ny fitomboan'ny Phenol ary koa ny phenol. Mifanohitra amin'izany kosa, ny tahan'ny famoahana akora hafa, toy ny 2-cyclohexen-1-one sy decanal, dia nihena niaraka tamin'ny fitomboan'ny taonan'ny urine, izay mifandray amin'ny fihenan'ny hamafin'ny signal (betsaka) ao amin'ny chromatogram (Sary 5D)-G havia) sy ny valinteny ara-batana amin'ireo akora ireo (Sary 5D-G havanana).
Amin'ny ankapobeny, ny fangaro sentetika dia nanana tahan'ny voajanahary mitovy amin'ny akora bioactive hita ao amin'ny fitrandrahana mivaingana amin'ny lohan'ny urine vaovao sy efa antitra (Sary 5D–G) ary toa tsy nahasarika olona firy tamin'ny fikarohana moka mpampiantrano (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Sary 5H) na moka mpitsentsitra ra (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Sary 5I). Na izany aza, ny fampitahana tsiroaroa taorian'ny fitsaboana dia naneho fa ny moka mitady mpampiantrano dia tena nahasarika ny fangaro sentetika amin'ny urine efa antitra 24 ora raha oharina amin'ny fanaraha-maso pentane (p = 0.0086; Sary 5H).
Mba hanombanana ny anjara asan'ny singa tsirairay ao anatin'ny fangaro sentetika amin'ny urine efa 24 ora, dia notombanana tamin'ny fangaro feno tao amin'ny fanadihadiana fantsona Y ny fangaro subtractive enina, izay nanesorana ireo singa tsirairay. Ho an'ny moka mitady mpampiantrano, ny fanesorana ireo singa tsirairay avy amin'ny fangaro feno dia nisy fiantraikany lehibe tamin'ny fihetsiky ny fitondran-tena (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Rakitra fanampiny 1: Sary S2A), ny fangaro subtractive rehetra dia manintona kokoa noho ny kely kokoa noho ny mifangaro tanteraka. Mifanohitra amin'izany, ny fanesorana ireo singa tsirairay avy amin'ny fangaro sentetika tanteraka dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny fihetsiky ny moka mitsentsitra ra (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), afa-tsy ny decanal, izay niafara tamin'ny ambaratonga ambany kokoa raha oharina amin'ny fangaro feno Attraction (p = 0.022; Rakitra fanampiny 1: Sary S2B).
Tao amin'ny tanàna iray feno tazomoka any Etiopia, dia nojerena nandritra ny folo alina ny fahombiazan'ny fangaro sentetika amin'ny amanin'omby mandritra ny 24 ora amin'ny fisarihana moka eny an-tsaha (Sary 6A). Moka miisa 4 861 no voasambotra sy voafaritra, ka ny 45.7% amin'izany dia Anthropus.gambiae sl, 18.9% dia Anopheles pharoensis ary 35.4% dia Culex spp. (Rakitra fanampiny 1: Tabilao S1). Anopheles arabinis no hany karazana Gambiana fantatra amin'ny alalan'ny fanadihadiana PCR. Amin'ny ankapobeny, moka 320 no voasambotra isaky ny alina, izay nahitana moka betsaka kokoa noho ny fandrika misy fangaro sentetika tsy misy fangaro ny fandrika (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001). Napetraka ny fandrika tsy misy fandrika isaky ny alina dimy fanaraha-maso tamin'ny fiandohana, afovoany ary faran'ny fitsapana. Moka mitovy isa no voasambotra isaky ny tsiroaroa. fandrika, izay manondro fa tsy misy fiangarana eo amin'ny trano (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) ary tsy misy fihenan'ny isan'ny moka nandritra ny vanim-potoanan'ny fandalinana. Raha ampitahaina amin'ny fandrika fanaraha-maso, dia nitombo be ny isan'ny moka tratra tao amin'ny fandrika misy ny fangaro sentetika: fitadiavana mpampiantrano (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), fihinanana ra vao haingana (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) ary fitondrana vohoka (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Rakitra fanampiny 1: Tabilao S1). Hita taratra amin'ny isan'ny moka tratra ihany koa izany: mpampiantrano mitady > mpitsentsitra ra > bevohoka > bevohoka antsasany > lahy.
Fanombanana eny an-kianja ny fahombiazan'ny fangaro fofona aman-dranomasin'omby sentetika mandritra ny 24 ora. Natao tany atsimo-afovoan'i Etiopia (sarintany), akaikin'ny tanànan'i Maki (ampidiro) ny andrana eny an-kianja, tamin'ny fampiasana fandrika jiro avy amin'ny Foibe Fanaraha-maso ny Aretina (CDC) (ankavanana) tao anaty trano mifanandrify, miaraka amin'ny endrika efamira latina (sary avy eny ambony) (A). Ny fandrika masoandro CDC misy fofona sentetika dia manintona sy misambotra ny Anopheles arabesques vavy (B), fa tsy ny Anopheles farroes (C), amin'ny fomba hafa, fiantraikany miankina amin'ny toe-javatra ara-batana. Ho fanampin'izany, ireo fandrika ireo dia nisambotra ny isan'ny moka Culex mpampiantrano izay nitombo be. (D) Raha ampitahaina amin'ny fanaraha-maso. Ny bara eo ankavia dia maneho ny salan'isa amin'ny fisafidianana moka tratra amin'ny fandrika odorant bait (maitso) sy fanaraha-maso (misokatra) (N = 10), raha ny bara eo ankavanana kosa dia maneho ny salan'isa amin'ny fisafidianana amin'ny fandrika fanaraha-maso (misokatra; N = 5). Ny kintana dia manondro ny haavon'ny dikany ara-statistika (*p = 0.01 ary ***p < 0.0001)
Samy hafa ny fomba nisamborana ireo karazana telo ireo tao anaty fandrika misy fangaro sentetika.  Nitady mpampiantrano (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), nihinana ra (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) ary bevohoka (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) ny .arabiensis voafandrika tao anaty fandrika ka namoaka ny fangaro sentetika (Sary 6B), raha tsy niova kosa ny habetsahan'ny An.  Hita fa samy hafa ny toetran'ny Pharoensis (Sary 6C).  Ho an'ny Culex, fitomboana be dia be teo amin'ny isan'ny moka mitady mpampiantrano ihany no hita tao anaty fandrika nasiana fangaro sentetika (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Sary 6D), raha oharina amin'ny fandrika fanaraha-maso.
Nampiasaina ireo fandrika fandrika napetraka ivelan'ny toerana mety ho an'ny mpampiantrano eo anelanelan'ny toerana fiompiana sy ireo vondrom-piarahamonina ambanivohitra any Etiopia mba hanombanana raha toa ka mampiasa ny fofona aman-omby ho toy ny toeram-ponenana ny moka voan'ny tazomoka. Raha tsy misy ny fofona aman-omby, na hafanana, ary miaraka na tsy misy ny fofona aman-omby, dia tsy nisy moka voasambotra (Rakitra fanampiny 1: Sary S3). Na izany aza, raha teo anatrehan'ny hafanana avo sy ny fofona aman-omby, dia voasarika sy voasambotra ny moka vavy voan'ny tazomoka, na dia vitsy aza ny isany, tsy miankina amin'ny taonan'ny aman-omby (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Rakitra fanampiny 1: Sary S3). Mifanohitra amin'izany kosa, ny fanaraha-maso ny rano dia tsy nahazo ny moka voan'ny tazomoka tamin'ny hafanana avo (Rakitra fanampiny 1: Sary S3).
Mahazo sy mizara akora misy azota ny moka tazomoka amin'ny alalan'ny fihinanana manonitra ny amanin'omby (izany hoe, dobo filomanosana) mba hanatsarana ny toetra mampiavaka ny fiainana, mitovy amin'ny bibikely hafa [2, 4, 24, 25, 26]. Loharano azo havaozina mora azo ny amanin'omby izay mifandray akaiky amin'ny toeram-pialan-tsasatry ny mpitondra tazomoka, toy ny tranon'omby sy ny zavamaniry avo akaikin'ny trano ambanivohitra sy toerana fanatodizana. Ny moka vavy dia mahita io loharano io amin'ny alalan'ny fofona ary afaka mandrindra ny fidiran'ny akora misy azota ao amin'ny amanin'omby, anisan'izany ny urea, ny singa azota lehibe indrindra ao amin'ny amanin'omby [15, 16]. Miankina amin'ny toetry ny moka vavy, ny otrikaina ao amin'ny amanin'omby dia zaraina mba hanatsarana ny asa fanidinana sy ny fahaveloman'ny moka vavy mitady mpampiantrano, ary koa ny fahavelomana sy ny toetran'ny fananahan'ny olona mihinana ra mandritra ny tsingerin'ny gonadotropika voalohany. Noho izany, ny fifangaroan'ny amanin'omby dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny sakafo ho an'ny mpitondra tazomoka izay mihidy toy ny olon-dehibe tsy ampy sakafo [8], satria manome fahafahana ny moka vavy hahazo akora misy azota manan-danja amin'ny alalan'ny fihinanana sakafo tsy dia mampidi-doza loatra. Ity zavatra hita ity dia misy fiantraikany epidemiolojika lehibe, satria ny vavy dia mampitombo ny androm-piainany, ny asany ary ny vokatra fananahana, izay samy misy fiantraikany amin'ny fahafahan'ny biby mpitatitra. Ankoatra izany, ity fihetsika ity dia mety ho lasibatry ny fandaharan'asa fitantanana ny biby mpitatitra amin'ny ho avy.