Սննդանյութերի ձեռքբերումն ու բաշխումը ներառում են միջատների կերակրման և կյանքի պատմության առանձնահատկությունները: Կյանքի տարբեր փուլերում որոշակի սննդանյութերի պակասը փոխհատուցելու համար միջատները կարող են այդ սննդանյութերը ստանալ լրացուցիչ սննդի միջոցով, օրինակ՝ ողնաշարավորների արտազատուկներով սնվելով՝ մի գործընթացով, որը հայտնի է որպես «փնջեր»: Anopheles arabiani մոծակը, կարծես, թերսնված է և, հետևաբար, սննդանյութերի կարիք ունի ինչպես նյութափոխանակության, այնպես էլ վերարտադրության համար: Այս ուսումնասիրության նպատակն էր գնահատել, թե արդյոք An. arabiensis-ի կողմից կովի մեզի վրա սննդանյութերի ձեռքբերման համար գրգռումը բարելավում է կյանքի պատմության բնութագրերը:
Համոզվեք, որ այն անվտանգ է։ arabiensis-ը գրավվել է թարմ, 24-ժամյա, 72-ժամյա և 168-ժամյա կովի մեզի հոտով, իսկ տեր փնտրող և արյունով կերակրված (արյունից 48 ժամ անց) էգերը չափվել են Y-խողովակի օլֆակտոմետրով, իսկ հղի էգերը գնահատվել են ձվադրման թեստի համար։ Այնուհետև օգտագործվել է քիմիական և էլեկտրաֆիզիոլոգիական համակցված վերլուծություն՝ կովի մեզի մեջ կենսաակտիվ միացությունները բոլոր չորս տարիքային խմբերում նույնականացնելու համար։ Կենսաբանական ակտիվ միացությունների սինթետիկ խառնուրդները գնահատվել են Y-խողովակի և դաշտային փորձարկումներում։ Կովի մեզի և դրա հիմնական ազոտ պարունակող միացության՝ միզանյութի՝ որպես մալարիայի վեկտորների համար պոտենցիալ լրացուցիչ սննդակարգերի ուսումնասիրության համար չափվել են սննդային պարամետրերը և կյանքի պատմության բնութագրերը։ Գնահատվել է էգ մոծակների համամասնությունը և կլանված կովի մեզի և միզանյութի քանակը։ Սնվելուց հետո էգերը գնահատվել են գոյատևման, կապված թռիչքի և վերարտադրության համար։
Փնտրեք տիրոջ արյունը և սնունդը։ Լաբորատոր և դաշտային ուսումնասիրություններում արաբներին գրավել է թարմ և հասուն կովի մեզի բնական և սինթետիկ բույրը։ Հղի էգերը անտարբեր էին կովի մեզի արձագանքի նկատմամբ ձվադրման վայրերում։ Տանտ փնտրող և արյուն ծծող էգերը ակտիվորեն կլանում են կովի մեզը և միզանյութը և բաշխում այդ ռեսուրսները՝ համաձայն կյանքի պատմության փոխզիջումների՝ որպես թռիչքի, գոյատևման կամ վերարտադրության համար ֆիզիոլոգիական վիճակի ֆունկցիա։
Anopheles arabinis-ը ձեռք է բերում և բաշխում կովի մեզի՝ կյանքի պատմության բնութագրերը բարելավելու համար: Կովի մեզի լրացուցիչ կերակրումը անմիջականորեն ազդում է վեկտորային կարողության վրա՝ ավելացնելով օրական գոյատևումը և վեկտորների խտությունը, և անուղղակիորեն՝ փոխելով թռիչքի ակտիվությունը, ուստի պետք է հաշվի առնվի ապագա մոդելներում:
Սննդանյութերի ձեռքբերումն ու բաշխումը ինտեգրում են միջատների կերակրման և կյանքի պատմության բնութագրերը [1,2,3]: Միջատները կարող են ընտրել և ձեռք բերել սնունդ և կատարել փոխհատուցող սնուցում՝ հիմնվելով սննդի առկայության և սննդանյութերի պահանջների վրա [1, 3]: Սննդանյութերի բաշխումը կախված է կյանքի պատմության գործընթացից և կարող է հանգեցնել սննդակարգի որակի և քանակի տարբեր պահանջների միջատների կյանքի տարբեր փուլերում [1, 2]: Որոշակի սննդանյութերի պակասը փոխհատուցելու համար միջատները կարող են ստանալ այդ սննդանյութերը լրացուցիչ կերակրման միջոցով, ինչպիսիք են՝ ցեխը, ողնաշարավորների տարբեր կղանքը և արտազատուկները, ինչպես նաև լեշը, մի գործընթաց, որը հայտնի է որպես ջրափոսեր [2]: Չնայած հիմնականում նկարագրվում են թիթեռների և ցեցերի բազմազան տեսակներ, ջրհորներ հանդիպում են նաև այլ միջատների կարգերում, և այս տեսակի ռեսուրսների նկատմամբ ձգողականությունը և դրանցով սնվելը կարող է զգալի ազդեցություն ունենալ առողջության և կյանքի պատմության այլ հատկանիշների վրա [2, 4, 5, 6], 7]: Մալարիայի Anopheles gambiae sensu lato (sl) մոծակը հանդես է գալիս որպես «թերսնված» չափահաս [8], ուստի ջրելը կարող է կարևոր դեր խաղալ նրա կյանքի պատմության բնութագրերում, բայց այս վարքագիծը մինչ օրս... անտեսվել է։ Այս կարևոր միջոցի մեջ սննդանյութերի ընդունումը մեծացնելու միջոցի համար գրգռման օգտագործումը ուշադրության է արժանի, քանի որ դա կարող է կարևոր համաճարակաբանական հետևանքներ ունենալ։
Չափահաս էգ Anopheles մոծակների ազոտի ընդունումը սահմանափակ է թրթուրային փուլից տեղափոխվող ցածր կալորիական պաշարների և արյան ալյուրի անարդյունավետ օգտագործման պատճառով [9]: Էգ Ann.gambiae sl-ը սովորաբար փոխհատուցում է սա՝ լրացուցիչ արյան ալյուրով լրացնելով [10, 11], այդպիսով ավելի շատ մարդկանց ենթարկելով հիվանդությունը վարակելու ռիսկի և մոծակներին ենթարկելով գիշատիչների ավելի մեծ ռիսկի: Այլընտրանքորեն, մոծակները կարող են օգտագործել ողնաշարավորների արտաթորանքների լրացուցիչ կերակրումը՝ ազոտական ​​միացություններ ձեռք բերելու համար, որոնք բարելավում են հարմարվողականությունը և թռիչքի մանևրելու ունակությունը, ինչպես ցույց են տալիս այլ միջատները [2]: Այս առումով հետաքրքիր է An-ի քույր տեսակներից մեկի ուժեղ և առանձնահատուկ գրավչությունը: Գամբիական sl տեսակների համալիրը՝ Anopheles arabinis-ը, թարմ և հասուն կովի մեզի [12,13,14], հետաքրքիր է: Anopheles arabinis-ը օպորտունիստական ​​է իր տիրոջ նախասիրություններում և հայտնի է նրանով, որ շփվում և սնվում է անասուններով: Կովի մեզը ազոտական ​​միացություններով հարուստ ռեսուրս է, որտեղ միզանյութը կազմում է թարմ մեզի ընդհանուր ազոտի 50-95%-ը [15, 16]: Քանի որ կովի մեզը հնանում է, միկրոօրգանիզմներն օգտագործում են այս ռեսուրսները՝ ազոտային միացությունների բարդությունը 24 ժամվա ընթացքում նվազեցնելու համար [15]: Ամոնիակի արագ աճի հետ մեկտեղ, որը կապված է օրգանական ազոտի նվազման հետ, ալկալոֆիլ միկրոօրգանիզմները (որոնցից շատերը արտադրում են մոծակների համար թունավոր միացություններ) ծաղկում են [15], որոնք կարող են լինել էգեր, որոնք նախընտրում են գրավվել 24 ժամ կամ ավելի քիչ հնեցված մեզի կողմից [13, 14]:
Այս ուսումնասիրության մեջ փնտրվել են տեր և արյունով կերակրվող Ans-ները: Առաջին գոնադոտրոպինային ցիկլի ընթացքում arabiensis-ը գնահատվել է ազոտային միացությունների, այդ թվում՝ միզանյութի ձեռքբերման համար՝ մեզի խառնելու միջոցով: Հաջորդը, անցկացվել են մի շարք փորձեր՝ գնահատելու համար, թե ինչպես են էգ մոծակները բաշխում այս պոտենցիալ սննդային ռեսուրսը՝ բարելավելու գոյատևումը, բազմացումը և հետագա կերակրումը: Վերջապես, գնահատվել է թարմ և հասուն կովի մեզի հոտը՝ որոշելու համար, թե արդյոք դրանք հուսալի ակնարկներ են տալիս տեր և արյունով կերակրվող An-ի համար: Այս պոտենցիալ սննդային ռեսուրսի որոնման ընթացքում arabiensis-ը հայտնաբերել է քիմիական փոխկապակցվածություններ դիտարկված տարբերակված գրավչության հետևում: 24-ժամյա հասունացած մեզի մեջ հայտնաբերված ցնդող օրգանական միացությունների (VOC) սինթետիկ հոտային խառնուրդները հետագայում գնահատվել են դաշտային պայմաններում՝ ընդլայնելով լաբորատոր պայմաններում ստացված արդյունքները և ցույց տալով խոշոր եղջերավոր անասունների մեզի հոտի ազդեցությունը տարբեր ֆիզիոլոգիական վիճակների վրա: Մոծակների գրավչություն: Ստացված արդյունքները հաստատում են, որ An. arabiensis-ը ձեռք է բերում և տարածում է ողնաշարավորների մեզի մեջ հայտնաբերված ազոտային միացությունները՝ ազդելու կյանքի պատմության բնութագրերի վրա: Այս արդյունքները քննարկվում են համաճարակաբանական հնարավոր հետևանքների և այն մասին, թե ինչպես դրանք կարող են օգտագործվել վեկտորների հսկողության և վերահսկման համար:
Anopheles arabicans-ը (Dongola շտամ) պահպանվել է 25 ± 2 °C ջերմաստիճանում, 65 ± 5% հարաբերական խոնավությամբ և 12:12 ժամ լույսի և մթության ցիկլով։ Թրթուրները մեծացվել են պլաստիկե տարաների մեջ (20 սմ × 18 սմ × 7 սմ), որոնք լցված են թորած ջրով և կերակրվել են Tetramin® ձկան կերով (Tetra Werke, Melle, DE): Թրթուրները հավաքվել են 30 մլ բաժակների մեջ (Nolato Hertila, Åstorp, SE) և այնուհետև տեղափոխվել Bugdorm վանդակներ (30 սմ × 30 սմ × 30 սմ; MegaView Science, Taichung, Taiwan)՝ չափահաս ձկներին դուրս գալու հնարավորություն տալու համար։ Մեծահասակ ձկներին տրամադրվել է 10% սախարոզի լուծույթ ad libitum մինչև դուրս գալուց 4 օր հետո (dpe), որից հետո տեր փնտրող էգերին առաջարկվել է կեր փորձից անմիջապես առաջ, կամ փորձից առաջ ամբողջ գիշեր թորած ջրով սովամահ են եղել, ինչպես նկարագրված է ստորև։ Թռչող խողովակի փորձերի համար օգտագործված էգերը սովամահ են եղել ընդամենը 4-6 ժամ՝ ջրով և... libitum: Արյուն ծծող մոծակներին հետագա կենսափորձարկումների համար պատրաստելու համար, 4 dpe էգերին տրամադրվել է դեֆիբրոտիկ ոչխարի արյուն (Håtunalab, Bro, SE)՝ օգտագործելով թաղանթային սնուցման համակարգ (Hemotek Discovery Workshops, Accrington, UK): Լիովին խցանված էգերը այնուհետև տեղափոխվել են առանձին վանդակներ և անմիջապես կեր են ստացել, ինչպես նկարագրված է ստորև, կամ 10% սախարոզ՝ ad libitum՝ ստորև նկարագրված փորձերից 3 օր առաջ: Վերջին էգերը օգտագործվել են թռիչքային խողովակի կենսափորձարկումների համար և տեղափոխվել լաբորատորիա, ապա փորձից 4-6 ժամ առաջ ստացել են ad libitum թորած ջուր:
Սննդի անալիզներ են կիրառվել չափահաս արաբ էգի մոտ մեզի և միզանյութի սպառումը քանակականացնելու համար։ Հյուրընկալող և արյունով կերակրվող էգերին 48 ժամվա ընթացքում տրամադրվել է սննդային ներկանյութ (1 մգ մլ-1 քսիլենցիանիդ FF; CAS 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Ստոկհոլմ, Շվեդիա) և մատակարարվել 4 × 4 մատրիցով 250 մկլ միկրոցենտրիֆուգային խողովակներում (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Նկար 1A): Լրացրեք մինչև եզրը (~300 մկլ): Մոծակների միջև մրցակցությունից և ներկանյութի գույնի հնարավոր ազդեցությունից խուսափելու համար 10 մոծակ տեղադրեք մեծ Պետրիի ամանի մեջ (12 սմ տրամագծով և 6 սմ բարձրությամբ; Semadeni, Ostermundigen, CH; Նկար 1A) լիակատար մթության մեջ 25 ± 2 սմ °C ջերմաստիճանում և 65 ± 5% հարաբերական ջերմաստիճանում: խոնավություն։ Այս փորձերը կրկնվել են 5-10 անգամ։ Սննդակարգին ենթարկվելուց հետո մոծակները տեղադրվել են -20°C ջերմաստիճանում մինչև հետագա վերլուծությունը։
Ուշադրություն դարձրեք տիրոջ և արյունածուծ Anopheles arabianus էգի կողմից կլանված խոշոր եղջերավոր անասունների մեզի և միզանյութի առկայությանը։ Սննդային փորձարկման (A) ժամանակ էգ մոծակներին տրամադրվել է թարմ և հասուն կովի մեզի, միզանյութի տարբեր կոնցենտրացիաների, սախարոզի (10%) և թորած ջրի (H2O) սննդակարգ։ Հյուրընկալող (B) և արյունածուծ (C) էգերը ավելի շատ սախարոզ են կլանել, քան փորձարկված ցանկացած այլ սննդակարգ։ Նկատի ունեցեք, որ տիրոջ փնտրող էգերը 72 ժամվա կովի մեզի մեջ կլանել են 168 ժամվա կովի մեզի մեջ պակաս (B)։ Մեզի միջին ընդհանուր ազոտի պարունակությունը (± ստանդարտ շեղում) ներկայացված է ներդիրում։ Հյուրընկալող (D, F) և արյունածուծ (E, G) էգերը միզանյութը կլանում են դեղաչափից կախված ձևով։ Տարբեր տառային անուններով միջին ներշնչված ծավալները (D, E) զգալիորեն տարբերվում էին միմյանցից (միակողմանի ANOVA՝ օգտագործելով Թյուքիի հետհոկ վերլուծությունը. p < 0.05)։ Սխալի սյուները ներկայացնում են միջինի ստանդարտ սխալը (BE)։ Ուղիղ գծիկավոր գիծը ներկայացնում է լոգարիթմական գծային ռեգրեսիայի գիծը (F, G)։
Կլանված սնունդը ազատելու համար մոծակները անհատապես տեղադրվեցին 1.5 մլ միկրոցենտրիֆուգային խողովակների մեջ, որոնք պարունակում էին 230 մկլ թորած ջուր, և հյուսվածքը մանրացվեց միանգամյա օգտագործման մանրատախտակի և անլար շարժիչի միջոցով (VWR International, Lund, SE), որին հաջորդեց ցենտրիֆուգացումը 10 կրպմ արագությամբ 10 րոպեի ընթացքում։ Վերին շերտը (200 մկլ) տեղափոխվեց 96-փոսանի միկրոպլետի (Sigma-Aldrich) մեջ, և կլանումը (λ620) որոշվեց սպեկտրոֆոտոմետրի վրա հիմնված միկրոպլետի ընթերցող սարքի միջոցով (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) նմ։ Այլընտրանքորեն, մոծակները մանրացվեցին 1 մլ թորած ջրի մեջ, որից 900 մկլ տեղափոխվեց կյուվետի մեջ սպեկտրոֆոտոմետրիկ վերլուծության համար (λ620 նմ; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE)։ Սննդային ընդունումը քանակականացնելու համար ստանդարտ կորը պատրաստվեց հաջորդական նոսրացմամբ՝ ստանալով 0.2 մկլ-ից մինչև 2.4 մկլ 1 մգ մլ-1։ քսիլենցիանիդ: Այնուհետև, հայտնի ներկանյութի կոնցենտրացիաների օպտիկական խտությունն օգտագործվել է յուրաքանչյուր մոծակի կողմից կուլ տրված սննդի քանակը որոշելու համար:
Ծավալային տվյալները վերլուծվել են միակողմանի դիսպերսիայի վերլուծության (ANOVA) միջոցով, որին հաջորդել են Թաքիի հետհոկ զույգային համեմատությունները (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989–2007): Գծային ռեգրեսիոն վերլուծությունները նկարագրել են կոնցենտրացիայից կախված միզանյութի ընդունումը և համեմատել տեր փնտրող և արյուն ծծող մոծակների արձագանքները (GraphPad Prism v8.0.0 Mac-ի համար, GraphPad Software, San Diego, CA, US):
Յուրաքանչյուր տարիքային խմբից մոտավորապես 20 մկլ մեզի նմուշներ կապվել են Chromosorb® W/AW (10 մգ 80/100 mesh, Sigma Aldrich) վրա և պարկուճավորվել են անագե պարկուճների մեջ (8 մմ × 5 մմ): Պարկուճները տեղադրվել են CHNS/O վերլուծիչի (Flash 2000, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ԱՄՆ) այրման խցիկ՝ թարմ և հասունացած մեզի մեջ ազոտի պարունակությունը որոշելու համար՝ համաձայն արտադրողի արձանագրության: Ընդհանուր ազոտը (գ Ն լ-1) քանակականացվել է՝ հիմնվելով որպես ստանդարտ օգտագործվող հայտնի միզանյութի կոնցենտրացիաների վրա:
Սննդակարգի ազդեցությունը տիրոջը փնտրող և արյուն ծծող էգերի գոյատևման վրա գնահատելու համար մոծակները անհատապես տեղադրվել են մեծ Պետրիի ամանների մեջ (12 սմ տրամագծով և 6 սմ բարձրությամբ՝ Սեմադենի), որոնց կափարիչի վրա ցանցով ծածկված անցք կար (3 սմ տրամագծով)՝ օդափոխության և սննդի մատակարարման համար: Սննդակարգերը տրամադրվել են անմիջապես 4 դպե-ից հետո և ներառում էին 1% նոսրացված թարմ և հասուն կովի մեզ, միզանյութի չորս կոնցենտրացիա և երկու վերահսկիչ խումբ, 10% սախարոզա և ջուր: Յուրաքանչյուր սննդակարգ պիպետով ներարկվել է ատամնաբուժական տամպոնի (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) վրա, որը տեղադրվել է 5 մլ ներարկիչի (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) մեջ, հանվել է մխոցը և տեղադրվել Պետրիի ամանի վրա (նկար 1):1A): Փոխեք ձեր սննդակարգը ամեն օր: Պահպանեք լաբորատորիան վերը նկարագրվածի պես: Կենդանի մնացած մոծակները հաշվարկվել են օրական երկու անգամ, մինչդեռ մահացած մոծակները հեռացվել են մինչև վերջին մոծակի մահը (n = 40 մեկ բուժման համար): Տարբեր սննդակարգերով սնվող մոծակների գոյատևումը վիճակագրորեն վերլուծվել է Կապլան-Մեյերի գոյատևման կորերի և լոգ-ռանկի թեստերի միջոցով: համեմատել սննդակարգերի միջև գոյատևման բաշխման համեմատությունները (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0):
Ատիսանոյի և այլոց [17] հիման վրա պատրաստված մոծակների դեմ թռչող ջրաղաց, պատրաստված 5 մմ հաստությամբ թափանցիկ ակրիլային վահանակներից (10 սմ լայնություն x 10 սմ երկարություն x 10 սմ բարձրություն)՝ առանց առջևի և հետևի վահանակների (Նկ. 3՝ վերևում): Գազային քրոմատոգրաֆիայի սյունակից (0.25 մմ ներքին տրամագիծ; 7.5 սմ երկարություն) պատրաստված ուղղահայաց խողովակով պտտվող հավաքույթ, որի ծայրերը սոսնձված են միջատի ասեղին, որը կախված է նեոդիմիումային մագնիսների զույգի միջև, որոնք գտնվում են միմյանցից 9 սմ հեռավորության վրա: Նույն նյութից պատրաստված հորիզոնական խողովակը (6.5 սմ երկարություն) կիսում էր ուղղահայաց խողովակը՝ ձևավորելով կապված թև և թև, որը կրում էր ալյումինե փայլաթիթեղի մի փոքր կտոր՝ որպես լույսը ընդհատող ազդանշան:
24 ժամ քաղցած էգերին 30 րոպե տրվել է վերը նշված սննդակարգը՝ նախքան զսպելը: Լիարժեք կերակրված էգ մոծակները այնուհետև անհատապես անզգայացվել են սառույցի վրա 2-3 րոպե և մեղրամոմով ամրացվել են միջատների համար նախատեսված քորոցներին (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE), ապա կապվել հորիզոնական խողովակների թևերին: Թռչող աղաց: Թռիչքի պտույտների քանակը գրանցվել է հատուկ ստեղծված տվյալների գրանցիչով, այնուհետև պահպանվել և ցուցադրվել է PC-Lab 2000™ ծրագրաշարի միջոցով (v4.01; Velleman, Gavere, BE): Թռչող աղացը տեղադրվել է կլիմայական կարգավորմամբ սենյակում (12 ժ:12 ժ, լուսավորություն: մութ, 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH):
Թռիչքային ակտիվության պատկերացման համար հաշվարկվել է թռիչքի ընդհանուր հեռավորությունը (մ) և հաջորդական թռիչքների ընդհանուր քանակը մեկ ժամում՝ 24 ժամվա ընթացքում։ Բացի այդ, առանձին կանանց կողմից թռիչքի միջին հեռավորությունները համեմատվել են տարբեր բուժումների միջև և վերլուծվել են միակողմանի ANOVA-ի և Թյուքիի հետհոկ վերլուծության միջոցով (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.), որտեղ միջին հեռավորությունը համարվել է կախյալ փոփոխական, մինչդեռ բուժումը՝ անկախ գործոն։ Բացի այդ, թռիչքների միջին քանակը հաշվարկվել է 10 րոպեանոց աճով։
An.arabiensis-ի վերարտադրողական կարողությունների վրա սննդակարգի ազդեցությունը գնահատելու համար, արյան հավաքագրումից հետո վեց էգ (4 դիետիկ էգ) անմիջապես տեղափոխվել են Bugdorm վանդակներ (30 սմ × 30 սմ × 30 սմ) և այնուհետև նրանց տրամադրվել է փորձարարական սննդակարգ 48 ժամվա ընթացքում, ինչպես նկարագրված է վերևում: Այնուհետև սննդակարգերը հանվել են, և երրորդ օրը 48 ժամով տրամադրվել են ձվադրման բաժակներ (30 մլ; Nolato Hertila), որոնք լցված են 20 մլ թորած ջրով, փոխելով յուրաքանչյուր 24 ժամը մեկ: Յուրաքանչյուր սննդակարգը կրկնվել է 20-50 անգամ: Ձվերը հաշվվել և գրանցվել են յուրաքանչյուր փորձարարական վանդակի համար: Ձվերի ենթատեսակները օգտագործվել են առանձին ձվերի միջին չափի և երկարության տատանումը (n ≥ 200 մեկ սննդակարգի համար) գնահատելու համար՝ օգտագործելով Dialux-20 մանրադիտակ (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE)՝ հագեցած Leica Camera (DFC) 320 R2-ով: Leica Microsystems Ltd., Գերմանիա): Մնացած ձվերը պահվել են կլիմայական կարգավորմամբ սենյակում՝ ստանդարտ բուծման պայմաններում, 24 ժամ, և չափվել է վերջերս դուրս եկած առաջին փուլի թրթուրների ենթատեսակ (n ≥ 200 մեկ կերաբաժնում), ինչպես նկարագրված է վերևում: Ձվերի քանակը և ձվերի ու թրթուրների չափերը համեմատվել են տարբեր մշակումների միջև՝ օգտագործելով միակողմանի ANOVA և Tukey-ի հետհոկ վերլուծություն (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.):
Արսի ցեղի զեբու խոշոր եղջերավոր անասուններից վերցված նմուշներից հավաքվել են թարմ (նմուշառումից 1 ժամ հետո), 24 ժամ, 72 ժամ և 168 ժամ հասունացած մեզի վերին հատվածում գտնվող ցնդող նյութեր: Հարմարության համար մեզի նմուշները վերցվել են վաղ առավոտյան, երբ կովերը դեռ գոմում էին: Մեզի նմուշները վերցվել են 10 անհատներից, և յուրաքանչյուր նմուշի 100-200 մլ-ը տեղափոխվել է առանձին պոլիամիդային թխման տոպրակների մեջ (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, Գերմանիա)՝ 3 լիտր տարողությամբ կափարիչով պոլիամիդում՝ վինիլքլորիդային պլաստիկե տակառներում: Յուրաքանչյուր խոշոր եղջերավոր անասունի մեզի նմուշի վերին հատվածում գտնվող ցնդող նյութերը վերցվել են կամ անմիջապես (թարմ) կամ սենյակային ջերմաստիճանում 24 ժամ, 72 ժամ և 168 ժամ հասունացումից հետո, այսինքն՝ մեզի յուրաքանչյուր նմուշ ներկայացուցչական էր յուրաքանչյուր տարիքային խմբի համար:
Գլխամասային ցնդող նյութերի հավաքման համար օգտագործվել է փակ ցիկլի համակարգ՝ ակտիվացված ածխածնով ֆիլտրված գազային հոսքը (100 մլ րոպե-1) պոլիամիդային տոպրակի միջով ադսորբցիոն սյուն 2.5 ժամ շրջանառելու համար՝ օգտագործելով դիաֆրագմային վակուումային պոմպ (KNF Neuberger, Ֆրայբուրգ, Գերմանիայի Դաշնություն): Որպես վերահսկիչ միջոց, գլխամասային տարածքի հավաքումը կատարվել է դատարկ պոլիամիդային տոպրակից: Ադսորբցիոն սյունը պատրաստված էր տեֆլոնային խողովակից (5.5 սմ x 3 մմ ներքին տրամագծով), որը պարունակում էր 35 մգ Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Միլֆորդ, Մասաչուսեթս, ԱՄՆ) ապակե բամբակի խցանների միջև: Օգտագործելուց առաջ սյունը լվացվել է 1 մլ վերաթորած n-հեքսանով (Merck, Դարմշտադտ, Գերմանիայի Դաշնություն) և 1 մլ պենտանով (99.0% մաքուր լուծիչ GC աստիճանի, Sigma Aldrich): Ադսորբված ցնդող նյութերը էլուացվել են 400 մկլ պենտանով: Գլխամասային տարածքի հավաքածուները միավորվել և պահվել են -20°C ջերմաստիճանում մինչև հետագա վերլուծության համար օգտագործումը:
Հյուրընկալող և արյուն ուտող An-ի վարքային արձագանքները: Թարմ, 24-ժամյա, 72-ժամյա և 168-ժամյա մեզից հավաքված գլխային տարածքի ցնդող քաղվածքները վերլուծվել են Arabidopsis մոծակներից ցնդող քաղվածքների համար՝ օգտագործելով ուղիղ ապակե խողովակի օլֆակտոմետր [18]: Փորձերը կատարվել են ZT 13-15-ի ընթացքում՝ An-ի տուն փնտրելու ակտիվության գագաթնակետային ժամանակահատվածում: Arab [19]: Ապակե խողովակի օլֆակտոմետրը (80 սմ × 9.5 սմ id) լուսավորվել է վերևից 3 ± 1 լյուքս կարմիր լույսով: Ածխով ֆիլտրված և խոնավացված օդի հոսքը (25 ± 2 °C, 65 ± 2% հարաբերական խոնավություն) անցել է կենսափորձարկումը 30 սմ վրկ արագությամբ: Օդը անցնում է չժանգոտվող պողպատե ցանցային ցանցերի շարքի միջով՝ ստեղծելով շերտավոր հոսք և միատարր փետուրի կառուցվածք: Ստոմատոլոգիական տամպոնի դիսպենսեր (4 սմ × 1 սմ; L:D; DAB Dental AB), կախված է օլֆակտոմետրի քամու ուղղությամբ ծայրին գտնվող 5 սմ կծիկից, Խթանիչի փոփոխությամբ յուրաքանչյուր 5 րոպեն մեկ։ Վերլուծության համար որպես խթան օգտագործվել է յուրաքանչյուր գլխամասային մզվածքի 10 մկլ, նոսրացված 1:10 հարաբերակցությամբ։ Որպես վերահսկիչ միջոց օգտագործվել է պենտանի հավասար քանակություն։ Փորձի մեկնարկից 2-3 ժամ առաջ առանձին տեր փնտրող կամ արյուն ծծող մոծակները տեղադրվել են առանձին ազատման վանդակներում։ Ազատման վանդակը տեղադրվել է օլֆակտոմետրի քամու ուղղությամբ, և մոծակներին թույլ են տվել 1 րոպե հարմարվել, ապա բացվել է վանդակի թիթեռի փականը ազատ արձակելու համար։ Բուժման կամ վերահսկողության նկատմամբ ներգրավումը վերլուծվել է որպես մոծակների այն համամասնությունը, որոնք շփման մեջ են մտել աղբյուրի հետ ազատ արձակումից հետո 5 րոպեի ընթացքում։ Գլխամասային յուրաքանչյուր ցնդող մզվածք և վերահսկիչ մզվածք կրկնվել են առնվազն 30 անգամ, և ցանկացած օրվա ազդեցությունից խուսափելու համար յուրաքանչյուր փորձարարական օրը փորձարկվել են նույն քանակությամբ բուժումներ և վերահսկիչներ։ Հյուրընկալողից և արյունով կերակրվողներից որոնողական արձագանքները։ Արաբական և գլխամասային խմբերը վերլուծվել են անվանական լոգիստիկ ռեգրեսիայի միջոցով, որին հաջորդել են զույգային համեմատություններ կենտ հարաբերակցությունների համար (JMP Pro, v14.0.0, SAS Ինստիտուտ Ինկ.)։
Անի ձվադրման արձագանքը։ Թարմ և հասուն կովի մեզի գլխամասային հատվածի քաղվածքները վերլուծվել են Bugdorm վանդակներում (30 սմ × 30 սմ × 30 սմ; MegaView Science): Ձվադրման հիմքը հանդիսացել են պլաստիկ բաժակներ (30 մլ; Nolato Hertila), որոնք լցված են 20 մլ թորած ջրով և տեղադրվել են վանդակի հակառակ անկյուններում՝ միմյանցից 24 սմ հեռավորության վրա: Բուժման բաժակները կարգավորվել են գլխամասային հատվածի յուրաքանչյուր քաղվածքի 10 մկլ-ով՝ 1:10 նոսրացմամբ: Վերահսկիչ բաժակը կարգավորելու համար օգտագործվել է պենտանի հավասար քանակություն: Բուժման և վերահսկիչ բաժակները փոխանակվել են յուրաքանչյուր փորձի միջև՝ դիրքի էֆեկտները վերահսկելու համար: Տասը արյունով կերակրվող էգ էգ էգ էգ է բաց թողնվել ZT 9-11-ում գտնվող փորձարարական վանդակներ, և բաժակներում ձվերը հաշվվել են 24 ժամ անց: Ձվադրման ինդեքսը հաշվարկելու բանաձևն է՝ (բուժման բաժակում դրված ձվերի քանակը - վերահսկիչ բաժակում դրված ձվերի քանակը)/(դրված ձվերի ընդհանուր քանակը): Յուրաքանչյուր մշակում կրկնվել է 8 անգամ:
Էգ An.arabiensis-ի գազային քրոմատոգրաֆիկ և էլեկտրոնային անտենայի պատկերի հայտնաբերման (GC-EAD) վերլուծությունը կատարվել է նախկինում նկարագրվածի պես [20]: Հակիրճ ասած, թարմ գլխամասային ցնդող քաղվածքները բաժանվել են Agilent Technologies 6890 GC սարքի միջոցով (Սանտա Կլարա, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ), որը հագեցած է HP-5 սյունակով (30 մ × 0.25 մմ ներքին տրամագիծ, 0.25 մկմ թաղանթի հաստություն, Agilent Technologies): և հասունացող մեզ։ Որպես շարժական փուլ օգտագործվել է ջրածին՝ 45 սմ վրկ միջին գծային հոսքի արագությամբ։ Յուրաքանչյուր նմուշ (2 մկլ) ներարկվել է 30 վայրկյան՝ առանց բաժանման ռեժիմով՝ 225 °C մուտքի ջերմաստիճանով։ Գազային հեղուկի վառարանի ջերմաստիճանը ծրագրավորվել է 35 °C-ից (3 րոպե պահպանում) մինչև 300 °C (10 րոպե պահպանում) 10 °C րոպե-1 ջերմաստիճանում։ Գազային հեղուկի բաժանիչում ավելացվել է 4 psi ազոտ և բաժանվել է 1:1 հարաբերակցությամբ Gerstel 3D/2 ցածր մեռյալ ծավալի խաչաձև սարքում (Gerstel, Mülheim, DE)՝ բոցի իոնացման դետեկտորի և EAD-ի միջև։ EAD-ի համար նախատեսված Գազային հեղուկի մազանոթը Gerstel ODP-2 փոխանցման գծով անցել է ապակե խողովակի (10 սմ × 8 մմ) մեջ, որտեղ այն խառնվել է ածխածնային ֆիլտրով, խոնավացված օդի հետ (1.5 լ րոպե-1)։ Անտենան տեղադրվել է Խողովակի ելքից 0.5 սմ հեռավորության վրա: Յուրաքանչյուր մոծակ կազմում էր մեկ կրկնօրինակ, իսկ տեր փնտրող մոծակների դեպքում յուրաքանչյուր տարիքի մեզի նմուշներում կատարվել էր առնվազն երեք կրկնօրինակ:
Թարմ և հասունացած խոշոր եղջերավոր անասունների մեզի գլխամասային հավաքածուներում կենսաակտիվ միացությունների նույնականացում՝ օգտագործելով համակցված գազային սպեկտրոմետր և զանգվածային սպեկտրոմետր (GC-MS; 6890 GC և 5975 MS; Agilent Technologies)՝ GC-EAD վերլուծության մեջ անտենային արձագանքներ ստանալու համար, որը գործում է էլեկտրոնային հարվածային իոնացման ռեժիմով՝ 70 eV-ով: Գազային սպեկտրոմետրը հագեցած էր HP-5MS UI-պատված միաձուլված սիլիցիումային մազանոթային սյունակով (60 մ × 0.25 մմ ներքին տրամագիծ, 0.25 մկմ թաղանթի հաստություն)՝ օգտագործելով հելիումը որպես շարժական փուլ՝ 35 սմ վրկ միջին գծային հոսքի արագությամբ: 2 մկլ նմուշ ներարկվել է նույն ներարկիչի կարգավորումներով և վառարանի ջերմաստիճանով, ինչ GC-EAD վերլուծության համար: Միացությունները նույնականացվել են իրենց պահպանման ժամանակի (Կովատի ինդեքս) և զանգվածային սպեկտրների հիման վրա՝ համեմատած հատուկ գրադարանի և NIST14 գրադարանի (Agilent) հետ: Նույնականացված միացությունները հաստատվել են իսկական ստանդարտների ներարկմամբ (Լրացուցիչ ֆայլ 1. Աղյուսակ S2): Քանակական որոշման համար օգտագործվել է հեպտիլացետատ (10 նգ, 99.8% քիմիական մաքրություն, Aldrich) ներարկվել է որպես արտաքին ստանդարտ։
Գնահատվում է թարմ և հասունացած մեզի մեջ հայտնաբերված կենսաակտիվ միացություններից բաղկացած սինթետիկ հոտի խառնուրդի արդյունավետությունը՝ տիրոջը փնտրող և արյուն ծծող Ans.arabiensis-ը գրավելու համար՝ օգտագործելով վերը նշված նույն օլֆակտոմետրը և արձանագրությունը: Սինթետիկ խառնուրդները ընդօրինակել են թարմ, 24-ժամյա, 48-ժամյա, 72-ժամյա և 168-ժամյա հասունացած մեզի խառը գլխային տարածքի ցնդող քաղվածքների միացությունների կազմը և համամասնությունները (Նկար 5D-G; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Աղյուսակ S2): Վերլուծության համար օգտագործվել է լիովին սինթետիկ խառնուրդի 1:100 նոսրացում՝ մոտավորապես 140-2400 նգ/ժ ընդհանուր արտանետման արագությամբ՝ տիրոջ և արյուն ծծող մոծակների համար գրավչությունը գնահատելու համար: Այնուհետև թեստը կատարվում է ամբողջական խառնուրդների վրա, որոնցում հեռացվում են ամբողջական խառնուրդի առանձին միացությունների հանվող խառնուրդները: Հյուրընկալողից և արյունով կերակրվող Ans.Arab-ից ստացված պատասխանները վերլուծվել են անվանական լոգիստիկ ռեգրեսիայի միջոցով, որին հաջորդել են զույգային համեմատություններ կենտ հարաբերակցությունների համար (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.):
Գնահատելու համար, թե արդյոք կովի մեզը կարող է ծառայել որպես մալարիայի մոծակների համար բնակավայրի ազդանշան, վերը նկարագրվածի պես հավաքված թարմ և հասուն կովի մեզը և ջուրը տեղադրվել են ցանցավոր 3 լիտրանոց դույլերի (100 մլ) մեջ և տեղադրվել են տիրոջ համար նախատեսված խայծի թակարդներում (BG-HDT տարբերակ; BioGents, Ռեգենսբուրգ, Գերմանիա): Տասը թակարդներ տեղադրվել են 50 մ հեռավորության վրա արոտավայրերում, գյուղական համայնքից 400 մ հեռավորության վրա (Սիլայ, Եթովպիա, 5°53'24''N, 37°29'24''E) և առանց խոշոր եղջերավոր անասունների, մշտական ​​բազմացման վայրերում և գյուղերում: Հինգ թակարդ տաքացվել է՝ տիրոջ առկայությունը մոդելավորելու համար, մինչդեռ հինգ թակարդները թողնվել են չտաքացված: Յուրաքանչյուր մշակման վայր գիշերը փոխվել է ընդհանուր առմամբ հինգ գիշեր: Տարբեր տարիքի մեզով խայծված թակարդներում որսացված մոծակների քանակը համեմատվել է լոգիստիկ ռեգրեսիայի միջոցով՝ բետա բինոմիալ բաշխմամբ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.):
Եթովպիայի Օրոմիա շրջանի Մակի քաղաքի մոտակայքում գտնվող մալարիայի էնդեմիկ գյուղում (8° 11′ 08″ հյուսիսային լայնություն, 38° 81′ 70″ արևելյան լայնություն; նկար 6Ա): Ուսումնասիրությունը անցկացվել է օգոստոսի կեսերից մինչև սեպտեմբերի կեսերը՝ տարեկան փակ տարածքներում մնացորդային ցողումից առաջ, ինչպես նաև երկար անձրևոտ սեզոնի ընթացքում: Ուսումնասիրության համար ընտրվել են գյուղի ծայրամասում գտնվող հինգ զույգ տներ (20-50 մ հեռավորության վրա) (Նկար 6Ա): Տները ընտրելու համար օգտագործված չափանիշներն էին՝ տանը կենդանիներ մուտք գործելը արգելվում էր, փակ տարածքներում եփելն արգելվում էր (գոյություն ունի փորձաշրջանի ընթացքում), և տներում, որտեղ առավելագույնը երկու բնակիչ կա, որոնք քնում են միջատասպանների դեմ պայքարի միջոցների մեջ: մշակված մոծակների ցանցի տակ: Էթիկական հաստատումը տրվել է Ադիս Աբեբայի համալսարանի Բնական գիտությունների ֆակուլտետի (CNS-IRB) ինստիտուցիոնալ հետազոտությունների էթիկայի վերանայման խորհրդի (IRB/022/2016) կողմից՝ համաձայն Հելսինկիի Համաշխարհային բժշկական ասոցիացիայի հռչակագրով սահմանված ուղեցույցների: Յուրաքանչյուր տնային տնտեսության ղեկավարի համաձայնությունը ստացվել է առողջապահական ընդլայնման աշխատակիցների օգնությամբ: Ամբողջ գործընթացը հաստատվում է շրջանային և ծխական («կեբելե») մակարդակով տեղական ինքնակառավարման մարմինների կողմից: Փորձարարական դիզայնը հետևել է 2 × 2 լատինական քառակուսի դիզայնին, որտեղ սինթետիկ խառնուրդներն ու վերահսկիչները առաջին գիշերը նշանակվել են զույգ տներում և հաջորդ փորձարարական գիշերը փոխանակվել տների միջև: Այս գործընթացը կրկնվել է տասը անգամ: Բացի այդ, ընտրված տներում մոծակների ակտիվությունը գնահատելու համար, CDC թակարդները տեղադրվել են հինգ անընդմեջ գիշերներ՝ դաշտային փորձարկման սկզբում, կեսին և վերջում՝ օրվա նույն ժամին:
Վեց կենսաակտիվ միացություններ պարունակող սինթետիկ խառնուրդը լուծվել է հեպտանի մեջ (97.0% լուծիչ՝ գազային ածխածնային աստիճանի, Sigma Aldrich) և արտազատվել է 140 նգ/ժամ՝ օգտագործելով բամբակյա պատրույգով դիսպենսեր [20]: Պատրույգով դիսպենսերը թույլ է տվել, որ բոլոր միացությունները արտազատվեն հաստատուն համամասնություններով ամբողջ 12-ժամյա փորձի ընթացքում: Հեպտանինն օգտագործվել է որպես վերահսկիչ: Սրվակը կախված է եղել Հիվանդությունների վերահսկման և կանխարգելման կենտրոնների (CDC) լուսային թակարդի մուտքի կետի կողքին (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Նկար 6A): Թակարդները կախված են եղել գետնից 0.8-1 մ բարձրության վրա, մահճակալի ստորոտի մոտ, և կամավորը քնել է չմշակված մոծակների ցանցի տակ և գործել է ժամը 18:00-ից մինչև 06:30-ը: Սեռի և ֆիզիոլոգիական կարգավիճակի (չկերակրված, կերակրված, կիսահղի և հղի [21]) միջոցով որսացված մոծակները հետագայում ստուգվել են պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի (PCR) վերլուծության միջոցով՝ A. gambiae sl ձևաբանորեն նույնականացված տեսակը նույնականացնելու համար: Համալիրի անդամներ [23]: Դաշտային ուսումնասիրության ընթացքում զույգ տների թակարդային թակարդումը վերլուծվել է անվանական լոգիստիկ համապատասխանության մոդելի միջոցով, որտեղ ձգողականությունը կախյալ փոփոխական էր, իսկ բուժումը (սինթետիկ խառնուրդ ընդդեմ վերահսկողության)՝ ֆիքսված էֆեկտը (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc.): Այստեղ մենք ներկայացնում ենք χ2 և p-արժեքները հավանականության հարաբերակցության թեստից:
Գնահատեք, թե արդյոք այն անվտանգ է։ arabiensis-ը կարողացավ ստանալ մեզ՝ իր հիմնական ազոտի աղբյուրը՝ միզանյութը, ուղիղ կերակրման միջոցով, ընդունումից հետո 48 ժամվա ընթացքում (dpe) տիրոջը փնտրող և արյունով կերակրվող էգերի կերակրման փորձարկումներից հետո 4 օրվա ընթացքում (Նկար 1Ա): Եվ՛ տիրոջը փնտրող, և՛ արյուն ծծող էգերը զգալիորեն ավելի շատ սախարոզ են կլանել, քան ցանկացած այլ սննդակարգ կամ ջուր (F(5,426) = 20.15, p < 0.0001 և F(5,299) = 56.00, p < 0.0001, համապատասխանաբար; Նկար 1Բ,Գ): Ավելին, տիրոջը փնտրող էգերը 72 ժամվա ընթացքում ավելի քիչ մեզ են կերել, քան 168 ժամվա ընթացքում (Նկար 1Բ): Երբ նրանց առաջարկվել է միզանյութ պարունակող սննդակարգ, տիրոջը փնտրող էգերը կլանել են զգալիորեն ավելի մեծ քանակությամբ միզանյութ՝ 2.69 մՄ՝ համեմատած մյուս բոլոր կոնցենտրացիաների և ջրի հետ, մինչդեռ չեն տարբերվում 10% սախարոզից (F(10,813) = 15.72, p < 0.0001; Նկար 1D): Սա հակադրվում էր արյունով կերակրվող էգերի արձագանքին, որոնք սովորաբար զգալիորեն ավելի շատ միզանյութ պարունակող սննդակարգ էին կլանում, քան ջուր, թեև զգալիորեն պակաս, քան 10% սախարոզ (F(10,557) = 78.35, p < 0.0001; Նկար 1).1E): Ավելին, երկու ֆիզիոլոգիական վիճակները համեմատելիս, ֆլեբոտոմացված էգերը ամենացածր կոնցենտրացիաներում ավելի շատ միզանյութ էին կլանում, քան տեր փնտրող էգերը, և այս էգերը կլանում էին միզանյութի նմանատիպ քանակություններ ավելի բարձր կոնցենտրացիաներում (F(1,953) = 78.82, p < 0.0001; Նկար 1F, G): Մինչդեռ միզանյութ պարունակող սննդակարգից ընդունումը, կարծես, օպտիմալ արժեքներ ուներ (Նկար 1D,E), երկու ֆիզիոլոգիական վիճակներում էլ էգերը կարողացան մոդուլացնել կլանված միզանյութի քանակը միզանյութի կոնցենտրացիաների ամբողջ միջակայքում՝ լոգարիթմական գծային եղանակով (Նկար 1F,G): Նմանապես, մոծակները, կարծես, վերահսկում են իրենց ազոտի կլանումը՝ կարգավորելով կլանված մեզի քանակը, քանի որ մեզի մեջ ազոտի քանակը արտացոլվում է կլանված քանակի մեջ (Նկար 1Բ, Գ և Բ ներդիրներ):
Մեզի և միզանյութի ազդեցությունը տեր փնտրող և արյուն ծծող մոծակների գոյատևման վրա գնահատելու համար էգերին կերակրել են բոլոր չորս տարիքի (թարմ, նստվածքից 24 ժամ, 72 ժամ և 168 ժամ անց) և միզանյութի տարբեր կոնցենտրացիաների, ինչպես նաև թորած ջրի և 10% սախարոզի մեզով՝ որպես վերահսկիչ (Նկար 2Ա): Այս գոյատևման վերլուծությունը ցույց է տվել, որ սննդակարգը զգալի ազդեցություն է ունեցել տեր փնտրող էգերի (մեզի՝ χ2 = 108.5, df = 5, p < 0.0001; միզանյութ՝ χ2 = 122.8, df = 5, p < 0.0001; Նկար 2Բ, Գ) և արյունով կերակրված էգերի (մեզի՝ χ2 = 93.0, df = 5, p < 0.0001; միզանյութ՝ χ2 = 137.9, df = 5, p < 0.0001; Նկար 2Դ,Ե) ընդհանուր գոյատևման վրա: Բոլոր փորձերում էգերին կերակրել են Մեզի, միզանյութի և ջրի սննդակարգը զգալիորեն ցածր գոյատևման մակարդակ ուներ՝ համեմատած սախարոզային սննդակարգով կերակրվող էգերի հետ (Նկար 2B-E): Թարմ և հնացած մեզով կերակրվող էգերը ցուցաբերել են տարբեր գոյատևման մակարդակներ, ընդ որում՝ 72 ժամվա հնացած մեզով (p = 0.016) կերակրվողները ունեցել են ամենացածր գոյատևման հավանականությունը (Նկար 2B): Ավելին, 135 մՄ միզանյութով կերակրվող էգերը ավելի երկար են ապրել, քան ջուր ստացող վերահսկիչ խումբը (p < 0.04) (Նկար 2C): Ջրի համեմատ, թարմ մեզով և 24 ժամվա մեզով կերակրվող կանայք ավելի երկար են ապրել (համապատասխանաբար՝ p = 0.001 և p = 0.012; Նկար 2D), մինչդեռ 72 ժամվա մեզով կերակրվող կանայք ավելի երկար են ապրել, քան կարճ թարմ մեզով և 24 ժամվա հասունացած մեզով կերակրվող էգերը (համապատասխանաբար՝ p < 0.0001 և p = 0.013; Նկար 2D): 135 մՄ միզանյութով կերակրվող էգերը արյունով կերակրվող էգերին ավելի երկար են ապրել, քան միզանյութի և ջրի մյուս բոլոր կոնցենտրացիաներով կերակրվողները (p < 0.0001 և p = 0.013; Նկար 2D): 135 մՄ միզանյութով կերակրվող էգերին արյունով կերակրվող էգերը ավելի երկար են ապրել, քան միզանյութի և ջրի մյուս բոլոր կոնցենտրացիաներով կերակրվող էգերին (p < 1.0001): 0.013; Նկար 2Ե):
Տանտիրոջ և արյունածուծ Anopheles arabinis-ի էգ կենդանիների գոյատևումը, որոնք սնվում են կովի մեզով և միզանյութով։ Կենսաբանական փորձարկման (A) ընթացքում էգ մոծակներին տրամադրվել է թարմ և հասուն կովի մեզից, միզանյութի տարբեր կոնցենտրացիաներից, սախարոզից (10%) և թորած ջրից (H2O) բաղկացած սննդակարգ։ Տանտիրոջը փնտրող (B, C) և արյունածուծ (D, E) մոծակների գոյատևումը գրանցվել է յուրաքանչյուր 12 ժամը մեկ, մինչև մեզով (B, D) և միզանյութով (C, E) սնվող բոլոր էգերը, ինչպես նաև սախարոզը և ջուրը սնվող վերահսկիչ խմբերը մահանան։
24-ժամյա թռիչքային ջրաղացի փորձարկման արդյունքում որոշված ​​ընդհանուր հեռավորությունը և փուլերի քանակը տարբերվում էին տեր փնտրող և արյուն ծծող մոծակների մոտ, որոնք ընդհանուր առմամբ ցուցաբերել են ավելի քիչ թռիչքային ակտիվություն (Նկար 3): Թարմ և հասուն մեզի կամ սախարոզայի և ջրի մատակարարող տեր փնտրող մոծակները ցուցաբերել են թռիչքի տարբեր օրինաչափություններ (Նկար 3), ընդ որում՝ թարմ մեզիով սնվող էգերը ավելի ակտիվ են եղել լուսաբացին, մինչդեռ 24 և 168 ժամվա մեզի կերակրողները: Մեզով սնվող էգերը ցուցաբերել են թռիչքի տարբեր օրինաչափություններ և հիմնականում եղել են օրական: Սախարոզ կամ 72 ժամվա մեզի մատակարարող էգերը ցուցաբերել են ակտիվություն 24-ժամյա ժամանակահատվածում, մինչդեռ ջուր մատակարարող էգերը ավելի ակտիվ են եղել ժամանակահատվածի կեսին: Սախարոզով սնվող մոծակները ցուցաբերել են ամենաբարձր ակտիվությունը ուշ գիշերը և վաղ առավոտյան, մինչդեռ 72 ժամվա մեզի կուլ տվածները 24 ժամվա ընթացքում ունեցել են ակտիվության կայուն անկում (Նկար 3):
Որսորդ փնտրող արյունածուծ Anopheles arabinis էգի թռիչքի կատարողականը, որը սնվում է կովի մեզով և միզանյութով։ Թռիչքային ջրաղացի փորձարկման ժամանակ էգ մոծակները, որոնք սնվում էին թարմ և հասուն կովի մեզով, միզանյութի, սախարոզի (10%) և թորած ջրի (H2O) տարբեր կոնցենտրացիաներով, կապված էին հորիզոնական, ազատ պտտվող թևերին (վերևում)։ Հյուրընկալ փնտրող (ձախ) և արյունածուծ (աջ) էգերի համար գրանցվել է յուրաքանչյուր սննդակարգի համար ժամում թռիչքների ընդհանուր հեռավորությունը և քանակը 24 ժամվա ընթացքում (մուգ՝ մոխրագույն, բաց՝ սպիտակ)։ Միջին հեռավորությունը և բախումների միջին քանակը ներկայացված են ցիրկադային ակտիվության գրաֆիկի աջ կողմում։ Սխալի սյուները ներկայացնում են միջինի ստանդարտ սխալը։ Վիճակագրական վերլուծությունը տե՛ս տեքստում։
Ընդհանուր առմամբ, տեր փնտրող էգերի ընդհանուր թռիչքային ակտիվությունը 24 ժամվա ընթացքում հետևել է թռիչքի հեռավորությանը նման օրինաչափության։ Միջին թռիչքի հեռավորությունը զգալիորեն ազդվել է կլանված սննդակարգով (F(5, 138) = 28.27, p < 0.0001), և 72 ժամ մեզի կլանված տեր փնտրող էգերը թռել են զգալիորեն ավելի երկար հեռավորություններ՝ համեմատած մյուս բոլոր սննդակարգերի հետ (p < 0.0001), և սախարոզով սնված մոծակները թռել են ավելի երկար, քան թարմ (p = 0.022) և 24 ժամվա հասունացած մեզով (p = 0.022) սնված մոծակները։ Ի տարբերություն մեզի սննդակարգով նկարագրված թռիչքային ակտիվության օրինաչափության, միզանյութով սնված տեր փնտրող էգերը ցուցաբերել են կայուն թռիչքային ակտիվություն 24 ժամվա ընթացքում՝ գագաթնակետին հասնելով մութ փուլի երկրորդ կեսին (Նկար 3)։ Չնայած ակտիվության օրինաչափությունները նման էին, միզանյութով սնված տեր փնտրող էգերը զգալիորեն մեծացրել են միջին թռիչքի հեռավորությունը՝ կախված կլանված կոնցենտրացիայից (F(5, 138) = 1310.91, p < 0.0001): Միզանյութի ցանկացած կոնցենտրացիայով կերակրված տեր փնտրող էգերը ավելի երկար թռչեցին, քան ջուր կամ սախարոզ կերակրված էգերը (p < 0.03):
Արյունածծող մոծակների ընդհանուր թռիչքային ակտիվությունը կայուն էր և պահպանվել էր 24 ժամվա ընթացքում բոլոր սննդակարգերում, մթության երկրորդ կեսին մեզի ակտիվությունն աճել էր ջրով կերակրվող էգերի, ինչպես նաև թարմ և 24 ժամյա կերակրվող էգերի մոտ (նկար 3): Մինչդեռ մեզի սննդակարգը զգալիորեն ազդել է արյանով կերակրվող էգերի միջին թռիչքի հեռավորության վրա (F(5, 138) = 4.83, p = 0.0004), միզանյութային սննդակարգը չի ազդել (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) այլ մեզի և վերահսկիչ սննդակարգի հետ (թարմ, p = 0.0091; 72 ժամ, p = 0.0022; 168 ժամ, p = 0.001; սախարոզ, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036):
Մեզի և միզանյութի ազդեցությունը վերարտադրողական պարամետրերի վրա գնահատվել է ձվադրման կենսափորձարկումներում (Նկար 4Ա) և ուսումնասիրվել է յուրաքանչյուր էգի կողմից դրված ձվերի քանակի, ձվի չափի և նոր դուրս եկած առաջին փուլի թրթուրների հիման վրա։ Դրված ձվերի քանակը։ Մեզով կերակրվող արաբ էգերը տարբերվում էին սննդակարգից կախված (F(5,222) = 4.38, p = 0.0008; Նկար 4Բ)։ 24-ժամյա մեզով և արյան ալյուրով կերակրվող էգերը զգալիորեն ավելի շատ ձու էին դնում, քան այլ մեզով կերակրվող էգերը և նման էին սախարոզով կերակրվողներին (Նկար 4Բ)։ Նմանապես, մեզով կերակրվող էգերի կողմից դրված ձվերի չափը տարբերվում էր սննդակարգից կախված (F(5, 209) = 12.85, p < 0.0001), որտեղ 24-ժամյա մեզով և սախարոզով կերակրվող էգերը զգալիորեն ավելի մեծ ձու էին դնում, քան ջրով կերակրվող էգերը, մինչդեռ 168 ժամ մեզով կերակրվող էգերի ձվերը զգալիորեն ավելի փոքր էին (Նկար 4Գ)։ Բացի այդ, մեզով կերակրումը զգալիորեն ազդում էր թրթուրի չափի վրա (F(5, 187) = 7.86, p < 0.0001), որտեղ 24 և 72 ժամվա մեզով կերակրված էգերի ձվերից դուրս են գալիս զգալիորեն ավելի մեծ թրթուրներ, քան 24 և 72 ժամվա մեզով կերակրված էգերի ձվերից դուրս եկող ձվերից։ Ջրով կերակրված և 168 ժամվա մեզով կերակրված էգերի ձվերից դուրս եկող ձվերից (Նկար 4D):
Կովի մեզով և միզանյութով սնվող Anopheles arabinis-ի էգ մոծակների վերարտադրողական կարողությունը։ Արյունով սնվող էգ մոծակներին 48 ժամ կերակրել են թարմ և հասուն կովի մեզից, միզանյութի տարբեր կոնցենտրացիաներից, սախարոզից (10%) և թորած ջրից (H2O) բաղկացած կերերով, նախքան կենսափորձարկումներին դնելը և ձվադրման սուբստրատներ ստանալը 48 ժամ (A): Ձվերի քանակը (B, E), ձվի չափը (C, F) և թրթուրի չափը (D, G) զգալիորեն ազդվել են տրամադրված սննդակարգից (կովի մեզ՝ BD; միզանյութ՝ EG): Տարբեր տառային անուններով չափված յուրաքանչյուր պարամետրի միջին արժեքները զգալիորեն տարբերվում էին միմյանցից (միակողմանի ANOVA՝ օգտագործելով Tukey-ի հետհոկ վերլուծությունը; p < 0.05): Սխալի սյուները ներկայացնում են միջինի ստանդարտ սխալը:
Որպես մեզի հիմնական ազոտային բաղադրիչ, միզանյութը, երբ այն տրամադրվում էր որպես սննդակարգ արյունով կերակրվող էգերին, բոլոր ուսումնասիրություններում զգալիորեն ազդել է վերարտադրողական պարամետրերի վրա: Արյան կերակուրից հետո միզանյութով կերակրվող էգերի կողմից դրված ձվերի քանակը, կախված միզանյութի կոնցենտրացիայից (F(11, 360) = 4.69; p < 0.0001), 134 µM-ից մինչև 1.34 mM միզանյութի կոնցենտրացիաներով կերակրվող էգերը ավելի շատ ձու են դրել (Նկար 4E): 134 µM կամ ավելի միզանյութի կոնցենտրացիաներով կերակրվող էգերը ավելի մեծ ձու են դրել, քան ջրով կերակրվող էգերը (F(10, 4245) = 36.7; p < 0.0001; Նկար 4F), և թրթուրի չափը, չնայած մայրերի մոտ միզանյութի նմանատիպ կոնցենտրացիաների ազդեցությանը (F(10, 3305) = 37.9; p < 0.0001), ավելի փոփոխական էր (Նկար 4G):
Ընդհանուր գրավչությունը տիրոջը փնտրող խոշոր եղջերավոր անասունների մեզի գլխամասային ցնդող քաղվածքների նկատմամբ։ Ապակե խողովակի օլֆակտոմետրով գնահատված arabiensis-ը (Նկար 5Ա) զգալիորեն ազդվել է մեզի տարիքից (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Նկ. 5Բ)։ Հետհոկ վերլուծությունը ցույց է տվել, որ 24 ժամվա ընթացքում հնացած մեզի հոտը գրավչության զգալիորեն ավելի բարձր մակարդակներ է առաջացրել՝ համեմատած մյուս բոլոր բուժումների հետ (72 ժամ՝ p = 0.0060, 168 ժամ՝ p = 0.012, պենտան՝ p = 0.00070), բացառությամբ թարմ մեզի հոտի (p = 0.13; Նկար 5Բ)։ Չնայած արյուն ծծող մոծակների մեզի հոտի նկատմամբ ընդհանուր գրավչությունը զգալիորեն չէր տարբերվում (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067; Նկ. 5Գ), այս էգերը զգալիորեն ավելի գրավիչ էին գլխամասային ցնդող քաղվածքների նկատմամբ՝ համեմատած 72 ժամվա հասունացած մեզի հետ՝ համեմատած վերահսկիչ խմբի հետ (p = 0.0066; Նկար 5C):
Վարքային արձագանքներ բնական և սինթետիկ կովի մեզի հոտերի նկատմամբ՝ տիրոջ և արյունով կերակրվող Anopheles arabianus-ի որոնման ժամանակ։ Ապակե խողովակի օլֆակտոմետրի սխեմա (A)։ Թարմ և հասուն կովի մեզից գլխամասային ցնդող քաղվածքների ներգրավումը դեպի տիրոջ (B) և արյուն ծծող (C) մոծակներ։ Գտեք Lord An-ի շոշափուկների ռեակցիան։ Ցուցադրված են թարմ (D), 24-ժամյա (E), 72-ժամյա (F) և 168-ժամյա (G) հասուն կովի մեզից մեկուսացված գլխամասային քաղվածքները։ Էլեկտրոնային անտենայի հայտնաբերման (EAD) հետքերը ցույց են տալիս լարման փոփոխությունները գլխամասային բիոլոգիական ակտիվ միացությունների նկատմամբ, որոնք էլուացված են գազային քրոմատոգրաֆից և հայտնաբերվում են բոցի իոնացման դետեկտորի (FID) կողմից։ Սանդղակի գիծը ներկայացնում է արձագանքի ամպլիտուդը (mV)՝ ընդդեմ պահպանման ժամանակի (s)։ Ցուցադրված են կենսաբանորեն ակտիվ միացությունների հատկությունները և արտազատման արագությունները (μg h-1)։ Մեկ աստղանիշը (*) ցույց է տալիս կայուն ցածր ամպլիտուդային արձագանք։ Կրկնակի աստղանիշները (**) ցույց են տալիս չվերարտադրվող արձագանքները։ Գտեք տիրոջը (H) և Արյուն ծծող (I) An.arabiensis-ը տարբեր կերպ է արձագանքում թարմ և հասուն կովի մեզի հոտերի սինթետիկ խառնուրդներին: Տարբեր տառային անուններից գրավված մոծակների միջին համամասնությունները զգալիորեն տարբերվում էին միմյանցից (միակողմանի ANOVA՝ օգտագործելով Թյուքիի հետհոկ վերլուծությունը. p < 0.05): Սխալի սյուները ներկայացնում են սանդղակի ստանդարտ սխալը:
Էգ Ann.arabiensis-ը, արյան կերից 72 և 120 ժամ անց, ձվադրման ընթացքում, թարմ և հասուն կովի մեզից վերցված ցնդող քաղվածքների նկատմամբ նախապատվություն չի ցուցաբերել պենտանի վերահսկիչ խմբի համեմատ (χ2 = 3.07, p > 0.05; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկ. S1):
Էգ Ann.arabiensis-ի դեպքում GC-EAD և GC-MS վերլուծությունները բացահայտել են ութ, վեց, երեք և երեք կենսաակտիվ միացություններ (Նկար 5D-G): Չնայած էլեկտրաֆիզիոլոգիական ռեակցիաներ առաջացնող միացությունների քանակի տարբերություններ նկատվել են, այդ միացությունների մեծ մասը առկա է եղել թարմ և հասուն մեզից հավաքված յուրաքանչյուր գլխային տարածության ցնդող քաղվածքում: Հետևաբար, յուրաքանչյուր քաղվածքի համար հետագա վերլուծություններում ներառվել են միայն այն միացությունները, որոնք էգի բեղիկներից շեմից բարձր ֆիզիոլոգիական ռեակցիա են առաջացրել:
Գլխային տարածության հավաքածուում կենսաակտիվ միացությունների ընդհանուր ցնդող նյութերի արտազատման արագությունը թարմ մեզի մեջ 29 մկգ/ժ-ից աճել է մինչև 242 մկգ/ժ-1 168 ժամ հասունացած մեզի մեջ, հիմնականում պ-կրեզոլի և մ-ֆորմալդեհիդի պատճառով։ Ֆենոլի և ֆենոլի ավելացման շնորհիվ։ Ի տարբերություն դրա, այլ միացությունների, ինչպիսիք են 2-ցիկլոհեքսեն-1-ոնը և դեկանալը, արտազատման արագությունը նվազել է մեզի տարիքի ավելացմանը զուգընթաց, ինչը համընկնում է քրոմատոգրամում (Նկ. 5D)-G ձախ վահանակում) ազդանշանի ինտենսիվության (առատության) դիտարկված նվազման և այդ միացությունների նկատմամբ ֆիզիոլոգիական արձագանքների հետ (Նկ. 5D-G աջ վահանակում)։
Ընդհանուր առմամբ, սինթետիկ խառնուրդն ուներ թարմ և հասունացած մեզի գլխամասային հատվածների ցնդող քաղվածքներում հայտնաբերված կենսաակտիվ միացությունների նմանատիպ բնական հարաբերակցություն (Նկար 5D–G) և, կարծես, էականորեն գրավիչ չէր տիրոջ (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Նկար 5H) կամ արյուն ծծող մոծակների (χ2 = 4.91, df = 4, p = 0.30; Նկար 5I) որոնման ժամանակ։ Այնուամենայնիվ, մշակումների միջև զույգային համեմատությունները ցույց տվեցին, որ տեր փնտրող մոծակները զգալիորեն գրավիչ էին 24-ժամյա հասունացած մեզի սինթետիկ խառնուրդի համար՝ համեմատած պենտանի վերահսկիչ խմբի հետ (p = 0.0086; Նկար 5H):
24 ժամյա մեզի սինթետիկ խառնուրդներում առանձին բաղադրիչների դերը գնահատելու համար Y-խողովակի վերլուծության մեջ վեց հանված խառնուրդներ գնահատվել են ամբողջական խառնուրդների համեմատ, որոնցում առանձին միացությունները հեռացվել են: Հյուրընկալող մոծակների դեպքում առանձին միացությունները ամբողջական խառնուրդից հանելը զգալի ազդեցություն է ունեցել վարքային արձագանքների վրա (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկար S2A), բոլոր հանված խառնուրդները ավելի գրավիչ են եղել, քան լիովին խառնվածները: Ի տարբերություն դրա, առանձին միացությունների հեռացումը լիովին սինթետիկ խառնուրդից չի ազդել արյուն ծծող մոծակների վարքային արձագանքների վրա (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), բացառությամբ դեկանալի, որը հանգեցրել է ավելի ցածր մակարդակների՝ ամբողջական խառնուրդի համեմատ (p = 0.022; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկար S2B):
Եթովպիայի մալարիայի էնդեմիկ գյուղում տասը գիշերվա ընթացքում գնահատվել է դաշտային պայմաններում մոծակներին գրավելու 24-ժամյա կովի մեզի սինթետիկ խառնուրդի արդյունավետությունը (Նկար 6Ա): Ընդհանուր առմամբ որսացվել և նույնականացվել է 4861 մոծակ, որոնցից 45.7%-ը Anthropus.gambiae sl էին, 18.9%-ը՝ Anopheles pharoensis և 35.4%-ը՝ Culex spp. (Լրացուցիչ ֆայլ 1. Աղյուսակ S1): Anopheles arabinis-ը An.Gambian տեսակների համալիրի միակ անդամն է, որը նույնականացվել է ՊՇՌ վերլուծությամբ: Միջին հաշվով, մեկ գիշերվա ընթացքում որսացվել է 320 մոծակ, որի ընթացքում սինթետիկ խառնուրդով խայծերով թակարդները ավելի շատ մոծակներ են որսացել, քան խառնուրդ չունեցող զույգ թակարդները (χ2(0, 3196) = 170.0, p < 0.0001): Ոչ խայծային թակարդներ են տեղադրվել հինգ վերահսկիչ գիշերներից յուրաքանչյուրում՝ փորձարկման սկզբում, կեսին և վերջում: Նմանատիպ թվով մոծակներ են որսացվել յուրաքանչյուր զույգում: թակարդներ, որոնք ցույց են տալիս տների միջև կողմնակալության բացակայությունը (χ2(0, 1665) = 9 × 10-13, p > 0.05) և ուսումնասիրության ժամանակահատվածում պոպուլյացիայի նվազման բացակայությունը։ Վերահսկիչ թակարդների համեմատ, սինթետիկ խառնուրդ պարունակող թակարդներում բռնված մոծակների թիվը զգալիորեն աճել է. տեր փնտրող (χ2(0, 2107) = 138.7, p < 0.0001), վերջերս արյուն կերակրող (χ2(0, 650) = 32.2, p < 0.0001) և հղիություն (χ2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Աղյուսակ S1)։ Սա նաև արտացոլվում է բռնված մոծակների ընդհանուր թվի մեջ. տեր փնտրող > արյուն ծծող > հղի > կիսահղի > արու։
24-ժամյա սինթետիկ կովի մեզի հոտի խառնուրդի արդյունավետության դաշտային գնահատում: Դաշտային փորձարկումները անցկացվել են Եթովպիայի հարավ-կենտրոնական մասում (քարտեզ), Մակի քաղաքի մոտ (ներդիր), օգտագործելով Հիվանդությունների վերահսկման և կանխարգելման կենտրոնի (CDC) լուսային թակարդը (աջ) զույգ տներում, լատինական քառակուսի դիզայնով (օդային պատկեր) (A): Սինթետիկ հոտով CDC լուսային թակարդները գրավում և որսում են էգ Anopheles arabesques-ներին (B), բայց ոչ Anopheles farroes-ներին (C), այլ կերպ ասած՝ ֆիզիոլոգիական վիճակից կախված էֆեկտով: Բացի այդ, այս թակարդները որսացել են հյուրընկալող Culex մոծակների զգալիորեն ավելի մեծ քանակություն: (D) Համեմատած վերահսկիչ խմբի հետ: Ձախ կողմում գտնվող սյուները ներկայացնում են հոտավետ խայծի (կանաչ) և վերահսկիչ (բաց) թակարդների զույգերով որսված մոծակների միջին ընտրության ցուցանիշը (N = 10), մինչդեռ աջ կողմում գտնվող սյուները ներկայացնում են վերահսկիչ թակարդների զույգերով միջին ընտրության ցուցանիշը (բաց; N = 5): Աստղանիշները ցույց են տալիս վիճակագրական նշանակալիության մակարդակները (*p = 0.01 և ***p < 0.0001):
Երեք տեսակները տարբեր կերպ են որսացվել սինթետիկ խառնուրդներ պարունակող թակարդներում։ Հյուրընկալող փնտրելիս (χ2(1, 1345) = 71.7, p < 0.0001), արյունով սնուցման (χ2(1, 517) = 16.7, p < 0.0001) և հղիության ընթացքում (χ2(1, 180) = 6.11, p = 0.0134) arabiensis-ը հայտնվել է թակարդում՝ սինթետիկ խառնուրդը արձակելով (Նկար 6B), մինչդեռ An-ի քանակը չի տարբերվել։ Pharoensis-ը հայտնաբերվել է տարբեր ֆիզիոլոգիական վիճակներում (Նկար 6C): Culex-ի դեպքում սինթետիկ խառնուրդով խայծված թակարդներում հայտնաբերվել է միայն տերեր փնտրող մոծակների թվի զգալի աճ (χ2(1,1319) = 12.6, p = 0.0004; Նկ. 6D), համեմատած վերահսկիչ թակարդների հետ։
Եթովպիայի բազմացման վայրերի և գյուղական համայնքների միջև գտնվող պոտենցիալ տերերից դուրս գտնվող տերերի կողմից կովի մեզի հոտը որպես տերերի բնակավայրի ազդանշան օգտագործվել են տերերի համար նախատեսված թակարդներ, որոնք օգտագործվել են գնահատելու համար: Տիրերի ազդանշանների, ջերմության բացակայության դեպքում և կովի մեզի հոտի առկայության կամ բացակայության դեպքում մոծակներ չեն որսացել (Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկար S3): Այնուամենայնիվ, բարձր ջերմաստիճանի և կովի մեզի հոտի առկայության դեպքում մալարիայի էգ մոծակները գրավվել և որսացվել են, թեև փոքր քանակությամբ, անկախ մեզի տարիքից (χ2(5, 25) = 2.29, p = 0.13; Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկար S3): Ի տարբերություն դրա, ջրային վերահսկիչները չեն որսացել մալարիայի մոծակներին բարձր ջերմաստիճաններում (Լրացուցիչ ֆայլ 1. Նկար S3):
Մալարիայի մոծակները ազոտ պարունակող միացություններ են ձեռք բերում և տարածում կովի մեզի փոխհատուցող սնման միջոցով (այսինքն՝ ջրափոսերով)՝ կյանքի պատմության հատկանիշները բարելավելու համար, նման այլ միջատների [2, 4, 24, 25, 26]: Կովի մեզը հեշտությամբ հասանելի վերականգնվող ռեսուրս է, որը սերտորեն կապված է մալարիայի կրողների հանգստավայրերի հետ, ինչպիսիք են գոմերը և գյուղական տների և ձվադրման վայրերի մոտ գտնվող բարձր բուսականությունը: Էգ մոծակները այս ռեսուրսը գտնում են հոտի միջոցով և կարողանում են կարգավորել մեզի մեջ ազոտական ​​միացությունների, այդ թվում՝ միզանյութի՝ մեզի հիմնական ազոտական ​​բաղադրիչի կլանումը [15, 16]: Կախված էգ մոծակի ֆիզիոլոգիական վիճակից, մեզի մեջ սննդանյութերը բաշխվում են՝ բարձրացնելու տեր փնտրող էգ մոծակների թռիչքային ակտիվությունը և գոյատևումը, ինչպես նաև արյունով սնվող անհատների գոյատևման և վերարտադրողական բնութագրերը առաջին գոնադոտրոպ ցիկլի ընթացքում: Հետևաբար, մեզի խառնումը կարևոր սննդային դեր է խաղում մալարիայի կրողների համար, որոնք փակ են, ինչպես թերսնված չափահասները [8], քանի որ այն էգ մոծակներին հնարավորություն է տալիս ձեռք բերել կարևոր ազոտական ​​միացություններ՝ ցածր ռիսկի սնվելով: Այս հայտնագործությունն ունի զգալի համաճարակաբանական հետևանքներ, քանի որ էգերը երկարացնում են իրենց կյանքի տևողությունը: սպասելիքը, ակտիվությունը և վերարտադրողական արտադրողականությունը, որոնք բոլորն էլ ազդում են վեկտորային կարողության վրա: Ավելին, այս վարքագիծը կարող է լինել վեկտորային կառավարման ապագա ծրագրերի թիրախը: