Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። የሚጠቀሙበት የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የCSS ድጋፍ አለው። ለተሻለ ተሞክሮ፣ የዘመነ አሳሽ እንዲጠቀሙ እንመክራለን (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳኋኝነት ሁነታን እንዲያሰናክሉ)። ይህ በእንዲህ እንዳለ፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ጣቢያውን ያለ ቅጦች እና ጃቫስክሪፕት እናቀርባለን።
በቅርቡ፣ አርቲፊሻል የውሃ ናኖስትራክቸርስ (EWNS) በመጠቀም በናኖቴክኖሎጂ ላይ የተመሠረተ ኬሚካል የሌለው ፀረ-ተሕዋስያን መድረክ ተዘጋጅቷል። EWNS ከፍተኛ የገጽታ ክፍያ ያላቸው ሲሆን ከምግብ ወለድ በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን ጨምሮ ከብዙ ረቂቅ ተሕዋስያን ጋር መስተጋብር ሊፈጥሩ እና ሊያነቃቁ በሚችሉ ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎች (ROS) የተሞሉ ናቸው። እዚህ ላይ በተዋሃዱበት ጊዜ ባህሪያቸው ሊስተካከል እና ፀረ-ባክቴሪያ አቅማቸውን የበለጠ ለማሳደግ ሊመቻች እንደሚችል ታይቷል። የ EWNS የላቦራቶሪ መድረክ የተቀየሰው የውህደት መለኪያዎችን በመቀየር የ EWNS ባህሪያትን ለማስተካከል ነው። የ EWNS ባህሪያት (የ ROS ክፍያ፣ መጠን እና ይዘት) በዘመናዊ የትንታኔ ዘዴዎች መለየት። በተጨማሪም፣ እንደ Escherichia coli፣ Salmonella enterica፣ Listeria innocuous፣ Mycobacterium paraaccidentum እና Saccharomyces cerevisiae ባሉ የምግብ ወለድ ረቂቅ ተሕዋስያን ላይ ያላቸውን የማይክሮባላዊ የማነቃቃት አቅም ተገምግመዋል። እዚህ የቀረቡት ውጤቶች የ EWNS ባህሪያት በተዋሃዱበት ጊዜ በጥሩ ሁኔታ ሊስተካከሉ እንደሚችሉ ያሳያሉ፣ ይህም የኢንአክቲቪቲ ውጤታማነትን በከፍተኛ ሁኔታ ይጨምራል። በተለይም የገጽታ ክፍያ በአራት እጥፍ ጨምሯል እና ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎች ጨምሯል። የማይክሮባላዊው የማስወገጃ መጠን በማይክሮባላዊ ጥገኛነት ላይ የተመሰረተ ሲሆን ለ45 ደቂቃ 40,000 #/cc EWNS ለኤሮሶል መጠን ከተጋለጠ በኋላ ከ1.0 እስከ 3.8 ሎግ ይደርሳል።
ረቂቅ ተሕዋስያን ወይም መርዛማዎቻቸውን በመዋጥ ምክንያት የሚከሰተው የምግብ ወለድ በሽታ ዋና መንስኤ የማይክሮባላዊ ብክለት ነው። በዩናይትድ ስቴትስ ብቻ፣ የምግብ ወለድ በሽታ በየዓመቱ 76 ሚሊዮን የሚያህሉ ሕመሞችን፣ 325,000 የሆስፒታል መግባቶችን እና 5,000 የሚደርሱ ሞትን ያስከትላል። በተጨማሪም፣ የዩናይትድ ስቴትስ የግብርና መምሪያ (USDA) በዩናይትድ ስቴትስ ውስጥ ከተዘገቡት የምግብ ወለድ በሽታዎች ውስጥ 48% የሚሆኑትን ትኩስ ምርቶች ፍጆታ መጨመር ተጠያቂ እንደሆነ ይገምታል። በዩናይትድ ስቴትስ በምግብ ወለድ በሽታ አምጪ ተሕዋስያን ምክንያት የሚደርሰው የበሽታ እና የሞት ወጪ በጣም ከፍተኛ ሲሆን፣ በበሽታ ቁጥጥር እና መከላከል ማዕከላት (ሲዲሲ) መሠረት በዓመት ከ15.6 ቢሊዮን የአሜሪካ ዶላር በላይ ነው።
በአሁኑ ጊዜ የምግብ ደህንነትን ለማረጋገጥ የኬሚካል4፣ የጨረር5 እና የቴርማል6 ፀረ-ተሕዋስያን ጣልቃገብነቶች በአብዛኛው የሚከናወኑት በምርት ሰንሰለቱ (ብዙውን ጊዜ ከመከር በኋላ እና/ወይም በማሸጊያ ወቅት) ላይ ሳይሆን በተወሰነ ወሳኝ የቁጥጥር ነጥቦች (CCPs) ላይ ነው። ስለዚህም ለተሻጋሪ ብክለት የተጋለጡ ናቸው። 7. የምግብ ወለድ በሽታዎችን እና የምግብ መበላሸትን በተሻለ ሁኔታ ለመቆጣጠር በእርሻ-ወደ-ጠረጴዛ ቀጣይነት ላይ ሊተገበሩ የሚችሉ ፀረ-ተሕዋስያን ጣልቃገብነቶችን ይጠይቃል፣ ይህም የአካባቢ ተፅእኖን እና ወጪዎችን ይቀንሳል።
በቅርቡ፣ በኬሚካል የጸዳ፣ ናኖቴክኖሎጂ ላይ የተመሠረተ ፀረ-ተሕዋስያን መድረክ ተዘጋጅቷል፣ ይህም አርቲፊሻል የውሃ ናኖስትራክቸርስ (EWNS) በመጠቀም የገጽታ እና የአየር ላይ ባክቴሪያዎችን ማነቃቃት ይችላል። EWNS የተዋሃደው በሁለት ትይዩ ሂደቶች፣ ኤሌክትሮስፕሬይ እና የውሃ አዮኒዜሽን (ምስል 1a) በመጠቀም ነው። ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች EWNS ልዩ የሆነ የአካላዊ እና ባዮሎጂካል ባህሪያት ስብስብ እንዳላቸው አሳይተዋል8,9,10። EWNS በአንድ መዋቅር በአማካይ 10 ኤሌክትሮኖች እና አማካይ የናኖስኬል መጠን 25 nm ነው (ምስል 1b,c)8,9,10። በተጨማሪም፣ የኤሌክትሮን ስፒን ሬዞናንስ (ESR) EWNS ከፍተኛ መጠን ያለው ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎችን (ROS)፣ በዋናነት ሃይድሮክሲል (OH•) እና ሱፐርኦክሳይድ (O2-) ራዲካልስ (ምስል 1c)8 ይዟል (ምስል 1c)8። EVNS ለረጅም ጊዜ በአየር ውስጥ የሚገኝ ሲሆን በአየር ውስጥ ከተንጠለጠሉ እና በላዩ ላይ ካሉ ረቂቅ ተሕዋስያን ጋር ሊጋጭ ይችላል፣ ይህም የ ROS ክፍያቸውን ያደርሳል እና ረቂቅ ተሕዋስያንን ማነቃቃት ያስከትላል (ምስል 1d)። እነዚህ የመጀመሪያ ጥናቶች EWNS ከተለያዩ ግራም-አሉታዊ እና ግራም-አወንታዊ ባክቴሪያዎች ጋር መስተጋብር መፍጠር እና ማግበር እንደሚችል አሳይተዋል፣ ማይኮባክቴሪያን ጨምሮ፣ በገጽታዎች እና በአየር ውስጥ። የመተላለፊያ ኤሌክትሮን ማይክሮስኮፒ እንዳመለከተው የእንቅስቃሴ መቋረጥ የተከሰተው በሴል ሽፋን መበላሸት ነው። በተጨማሪም፣ አጣዳፊ የመተንፈስ ጥናቶች እንደሚያሳዩት ከፍተኛ መጠን ያለው EWNS የሳንባ ጉዳት ወይም እብጠት አያመጣም 8።
(ሀ) ኤሌክትሮስፕሬይ የሚከሰተው ፈሳሽ በያዘው የካፕላሪ ቱቦ እና በተቃራኒ ኤሌክትሮድ መካከል ከፍተኛ ቮልቴጅ ሲተገበር ነው። (ለ) የከፍተኛ ግፊት አተገባበር ሁለት የተለያዩ ክስተቶችን ያስከትላል፡ (i) የውሃ ኤሌክትሮስፕሬይ እና (ii) በ EWNS ውስጥ የተዘጉ የሪአክቲቭ ኦክሲጅን ዝርያዎች (አዮኖች) መፈጠር። (ሐ) የ EWNS ልዩ መዋቅር። (መ) በናኖስኬል ባህሪያቸው ምክንያት፣ EWNS በጣም ተንቀሳቃሽ ናቸው እና ከአየር ወለድ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ጋር መስተጋብር ሊፈጥሩ ይችላሉ።
የEWNS ፀረ-ተሕዋስያን መድረክ ትኩስ ምግብ ላይ የምግብ ወለድ ረቂቅ ተሕዋስያንን የማነቃቃት ችሎታው በቅርብ ጊዜ ታይቷል። እንዲሁም የEWNS ወለል ከኤሌክትሪክ መስክ ጋር በማጣመር የታለመ አቅርቦትን ለማሳካት ጥቅም ላይ ሊውል እንደሚችል ታይቷል። ከዚህም በላይ፣ ወደ 50,000 #/cm3 በሆነ EWNS ላይ ለ90 ደቂቃ ከተጋለጡ በኋላ ለኦርጋኒክ ቲማቲሞች የመጀመሪያ ውጤቶች አበረታች ነበሩ፣ እንደ ኢ. ኮላይ እና ሊስቴሪያ 11 ያሉ የተለያዩ የምግብ ወለድ ረቂቅ ተሕዋስያን ታይተዋል። በተጨማሪም፣ የመጀመሪያ ኦርጋኖሌፕቲክ ምርመራዎች ከቁጥጥር ቲማቲሞች ጋር ሲነፃፀሩ ምንም የስሜት ህዋሳት አላሳዩም። ምንም እንኳን እነዚህ የመጀመሪያ የማነቃቂያ ውጤቶች በጣም ዝቅተኛ በሆነ የEWNS መጠን 50,000 #/cc. ይመልከቱ፣ ከፍተኛ የማነቃቂያ አቅም የመያዝ እና የመበላሸት አደጋን የበለጠ ለመቀነስ የበለጠ ጠቃሚ እንደሚሆን ግልጽ ነው።
እዚህ፣ የ EWNS የፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያትን በጥሩ ሁኔታ ለማስተካከል እና የፀረ-ባክቴሪያ አቅማቸውን ለማሳደግ የ EWNS የፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያትን ማመቻቸት የሚያስችል የ EWNS ትውልድ መድረክ ልማት ላይ ጥናታችንን እናተኩራለን። በተለይም፣ ማመቻቸት የገጽታ ክፍያቸውን (የታለመ አቅርቦትን ለማሻሻል) እና የ ROS ይዘትን (የማያነቃነቅ ቅልጥፍናን ለማሻሻል) ላይ ያተኮረ ነው። ዘመናዊ የትንታኔ ዘዴዎችን በመጠቀም የተሻሻሉ የፊዚኮ-ኬሚካላዊ ባህሪያትን (መጠን፣ ክፍያ እና የ ROS ይዘት) ይለዩ እና እንደ E. ያሉ የተለመዱ የምግብ ረቂቅ ተሕዋስያንን ይጠቀሙ።
ኢቪኤንኤስ (EVNS) በአንድ ጊዜ ከፍተኛ ንፅህና ያለው ውሃ (18 MΩ ሴሜ–1) በመጠቀም እና አዮኒዜሽን በማድረግ የተቀናበረ ነው። የኤሌክትሪክ ኔቡላይዘር 12 በተለምዶ ፈሳሽ ነገሮችን ለማመንጨት እና ቁጥጥር የሚደረግበት መጠን ያላቸውን ፖሊመር እና ሴራሚክ ቅንጣቶች 13 እና ፋይበር 14 ውህደትን ለማካሄድ ያገለግላል።
በቀደሙት ህትመቶች 8፣ 9፣ 10፣ 11 ላይ እንደተገለጸው፣ በተለመደው ሙከራ፣ በብረት ካፕላሪ እና መሬት ላይ በተሰራ ቆጣሪ ኤሌክትሮድ መካከል ከፍተኛ ቮልቴጅ ተተግብሯል። በዚህ ሂደት ውስጥ ሁለት የተለያዩ ክስተቶች ይከሰታሉ፡ i) ኤሌክትሮስፕሬይ እና ii) የውሃ አዮኒዜሽን። በሁለቱ ኤሌክትሮዶች መካከል ጠንካራ የኤሌክትሪክ መስክ በተጨመቀው ውሃ ወለል ላይ አሉታዊ ክፍያዎች እንዲከማቹ ያደርጋል፣ ይህም የቴይለር ኮኖች እንዲፈጠሩ ያደርጋል። በዚህም ምክንያት፣ ከፍተኛ ኃይል ያላቸው የውሃ ጠብታዎች ይፈጠራሉ፣ ይህም እንደ ሬይሊ ቲዎሪ 16 ወደ ትናንሽ ቅንጣቶች መበታተናቸውን ይቀጥላሉ። በተመሳሳይ ጊዜ፣ ጠንካራ የኤሌክትሪክ መስኮች አንዳንድ የውሃ ሞለኪውሎች ኤሌክትሮኖችን እንዲሰነጠቁ እና እንዲያስወግዱ ያደርጋሉ (ionize)፣ ይህም ከፍተኛ መጠን ያለው ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎች (ROS) እንዲፈጠሩ ያደርጋል 17። በተመሳሳይ ጊዜ የተፈጠረ ROS18 በ EWNS ውስጥ ተሸፍኗል (ምስል 1c)።
በምስል 2a ላይ በዚህ ጥናት ውስጥ በ EWNS ውህደት ውስጥ የተገነባውን እና ጥቅም ላይ የዋለውን የ EWNS ማመንጫ ስርዓት ያሳያል። በተዘጋ ጠርሙስ ውስጥ የተከማቸ የተጣራ ውሃ በቴፍሎን ቱቦ (2 ሚሜ ውስጣዊ ዲያሜትር) በኩል ወደ 30G አይዝጌ ብረት መርፌ (የብረት ካፊላሪ) ገብቷል። የውሃ ፍሰት በጠርሙሱ ውስጥ ባለው የአየር ግፊት ቁጥጥር ይደረግበታል፣ በምስል 2ለ ላይ እንደሚታየው። መርፌው በቴፍሎን ኮንሶል ላይ ተጭኖ ከቆጣሪው ኤሌክትሮድ በተወሰነ ርቀት በእጅ ሊስተካከል ይችላል። ቆጣሪው ኤሌክትሮድ ለመነሻ መሃል ላይ ቀዳዳ ያለው የተወለወለ የአሉሚኒየም ዲስክ ነው። ከቆጣሪው ኤሌክትሮድ በታች ከአሉሚኒየም ናሙና ፈንጣጣ ጋር በናሙና ወደብ በኩል የተገናኘ ነው (ምስል 2ለ)። የናሙናውን አሠራር ሊያስተጓጉል የሚችል የኃይል መከማቸትን ለማስወገድ፣ ሁሉም የናሙና ክፍሎች በኤሌክትሪክ መሬት ላይ የተመሰረቱ ናቸው።
(ሀ) የተመረተ የውሃ ናኖስትራክቸር ማመንጫ ስርዓት (EWNS)። (ለ) የናሙና እና የኤሌክትሮስፕሬይ መስቀለኛ ክፍል፣ በጣም አስፈላጊ የሆኑትን መለኪያዎች ያሳያል። (ሐ) የባክቴሪያ እንቅስቃሴ ማቆም የሙከራ ማዋቀር።
ከላይ የተገለጸው የEWNS ትውልድ ስርዓት የEWNS ባህሪያትን በጥሩ ሁኔታ ለማስተካከል ቁልፍ የአሠራር መለኪያዎችን የመቀየር ችሎታ አለው። የተተገበረውን ቮልቴጅ (V)፣ በመርፌው እና በቆጣሪው ኤሌክትሮድ (L) መካከል ያለውን ርቀት እና በካፒላሪ በኩል ያለውን የውሃ ፍሰት (φ) ያስተካክሉ። የተለያዩ ውህዶችን ለመወከል የሚያገለግል ምልክት፡ [V (kV)፣ L (ሴሜ)]። የተወሰነ ስብስብ [V፣ L] የተረጋጋ የቴይለር ኮን ለማግኘት የውሃ ፍሰቱን ያስተካክሉ። ለዚህ ጥናት ዓላማ፣ የቆጣሪው ኤሌክትሮድ (D) ቀዳዳ ዲያሜትር በ0.5 ኢንች (1.29 ሴሜ) ተጠብቆ ቆይቷል።
ውስን በሆነው የጂኦሜትሪ እና አለመመጣጠን ምክንያት የኤሌክትሪክ መስክ ጥንካሬ ከመጀመሪያዎቹ መርሆዎች ሊሰላ አይችልም። በምትኩ፣ የQuickField™ ሶፍትዌር (Svendborg፣ ዴንማርክ)19 የኤሌክትሪክ መስክን ለማስላት ጥቅም ላይ ውሏል። የኤሌክትሪክ መስክ ወጥ አይደለም፣ ስለዚህ በካፒላሪ ጫፍ ላይ ያለው የኤሌክትሪክ መስክ እሴት ለተለያዩ ውቅሮች እንደ ማጣቀሻ እሴት ጥቅም ላይ ውሏል።
በጥናቱ ወቅት፣ በመርፌው እና በቆጣሪው ኤሌክትሮድ መካከል ያሉ በርካታ የቮልቴጅ እና የርቀት ጥምረቶች በቴይለር ኮን ምስረታ፣ በቴይለር ኮን መረጋጋት፣ በ EWNS የምርት መረጋጋት እና በመራባት አቅም ረገድ ተገምግመዋል። የተለያዩ ጥምረቶች በተጨማሪ ሰንጠረዥ S1 ውስጥ ይታያሉ።
የEWNS ትውልድ ስርዓት ውጤት በቀጥታ ከስካኒንግ ሞቢሊቲ ፓቲክል መጠን ተንታኝ (SMPS፣ ሞዴል 3936፣ TSI፣ Shoreview፣ MN) ጋር እንዲሁም ለኤሮሶል ሞገዶች ከኤሮሶል ፋራዴይ ኤሌክትሮሜትር (TSI፣ ሞዴል 3068B፣ Shoreview፣ MN) ጋር በቀድሞው ህትመታችን ላይ እንደተገለጸው ተለክቷል። ሁለቱም SMPS እና ኤሮሶል ኤሌክትሮሜትር በ0.5 ሊትር/ደቂቃ የፍሰት መጠን (ጠቅላላ የናሙና ፍሰት 1 ሊትር/ደቂቃ) ተፈትነዋል። የንጥረ ነገሮች ብዛት ክምችት እና የኤሮሶል ፍሰት ለ120 ሰከንዶች ተለክተዋል። መለኪያው 30 ጊዜ ተደግሟል። በአሁኑ መለኪያዎች ላይ በመመስረት፣ አጠቃላይ የኤሮሶል ክፍያ ይሰላል እና አማካይ የEWNS ክፍያ ለተወሰኑ የተመረጡ የEWNS ቅንጣቶች ጠቅላላ ብዛት ይገመታል። የEWNS አማካይ ዋጋ እኩልታ (1) በመጠቀም ሊሰላ ይችላል፡
IEl የሚለካው ጅረት ሲሆን፣ NSMPS በSMPS የሚለካው ዲጂታል ክምችት ሲሆን፣ φEl ደግሞ በኤሌክትሮሜትር የሚፈሰው የፍሰት መጠን ነው።
አንጻራዊ እርጥበት (RH) የገጽታ ክፍያን ስለሚነካ፣ በሙከራው ወቅት የሙቀት መጠኑ እና (RH) በቅደም ተከተል በ21°ሴ እና 45% ሳይለወጡ ቆይተዋል።
የአቶሚክ ኃይል ማይክሮስኮፒ (AFM)፣ Asylum MFP-3D (Asylum Research፣ Santa Barbara፣ CA) እና AC260T ፕሮጄክት (Olympus፣ Tokyo፣ Japan) የEWNSን መጠን እና የህይወት ዘመን ለመለካት ጥቅም ላይ ውለዋል። የAFM ቅኝት ድግግሞሽ 1 Hz፣ የቃኝ ቦታው 5 μm × 5 μm እና 256 የቃኝ መስመሮች ነበር። ሁሉም ምስሎች የAsylum ሶፍትዌርን በመጠቀም ለአንደኛ ደረጃ የምስል አሰላለፍ ተዳርገዋል (የጭምብል ክልል 100 nm፣ 100 pm ገደብ)።
የሙከራ ፈንገጡ ተወግዶ የሚካው ወለል ከቆጣሪው ኤሌክትሮድ በ2.0 ሴ.ሜ ርቀት ላይ ለ120 ሰከንድ አማካይ ጊዜ ተቀምጧል፤ ይህም የቅንጣት መሰባበርን እና የማይካው ገጽ ላይ መደበኛ ያልሆኑ ጠብታዎች እንዳይፈጠሩ ይከላከላል። EWNS በቀጥታ በአዲስ በተቆረጠው ሚካ (ቴድ ፔላ፣ ሬዲንግ፣ ካሊፎርኒያ) ገጽ ላይ ይረጫል። የAFM ስፕተር ከተነፈሰ በኋላ ወዲያውኑ የሚካው ገጽ ምስል። አዲስ የተቆረጠው ያልተሻሻለው ሚካ ገጽ የመገናኛ አንግል ወደ 0° ቅርብ ነው፣ ስለዚህ EVNS በሚካው ገጽ ላይ በጉልላት መልክ ይሰራጫል። የተበታተኑ ጠብታዎች ዲያሜትር (a) እና ቁመት (h) በቀጥታ ከAFM ቶፖግራፊ ተለክተው ቀደም ሲል በተረጋገጠው ዘዴያችን በመጠቀም የEWNS ዶሜድ ስርጭት መጠንን ለማስላት ጥቅም ላይ ውለዋል። በቦርዱ ላይ ያለው EWNS ተመሳሳይ መጠን እንዳለው ከግምት ውስጥ በማስገባት፣ ተመጣጣኝ ዲያሜትር እኩልታ (2) በመጠቀም ሊሰላ ይችላል፡
ቀደም ሲል በተዘጋጀው ዘዴያችን ላይ በመመስረት፣ በEWNS ውስጥ የአጭር ጊዜ ራዲካል መካከለኛ አካላት መኖራቸውን ለመለየት የኤሌክትሮን ስፒን ሬዞናንስ (ESR) ስፒን ወጥመድ ጥቅም ላይ ውሏል። ኤሮሶሎች 235 mM የDEPMPO(5-(diethoxyphosphoryl)-5-methyl-1-pyrroline-N-oxide) (Oxis International Inc.) የያዘ 650 μm Midget sparger (Ace Glass፣ Vineland፣ NJ) በኩል አረፋ ተደርገዋል። ሁሉም የESR መለኪያዎች የተከናወኑት በብሩከር EMX ስፔክትሮሜትር (Bruker Instruments Inc. Billerica፣ MA፣ USA) እና ጠፍጣፋ ፓነል ሴል በመጠቀም ነው። የAcquisit ሶፍትዌር (Bruker Instruments Inc. Billerica፣ MA፣ USA) መረጃውን ለመሰብሰብ እና ለመተንተን ጥቅም ላይ ውሏል። የROS ባህሪያት መወሰን የተከናወነው ለተወሰኑ የአሠራር ሁኔታዎች [-6.5 kV፣ 4.0 ሴ.ሜ] ብቻ ነው። የEWNS ክምችት የተለካው በኢምፓክተሩ ውስጥ የEWNS ኪሳራዎችን ከቆጠረ በኋላ በSMPS በመጠቀም ነው።
የኦዞን መጠን ቁጥጥር የተደረገው በ205 Dual Beam Ozone Monitor™ (2B Technologies, Boulder, Co) 8,9,10 በመጠቀም ነው።
ለሁሉም የEWNS ባህሪያት፣ አማካይ እሴቱ እንደ መለኪያ እሴት ጥቅም ላይ ይውላል፣ እና መደበኛ መዛባት እንደ የመለኪያ ስህተት ጥቅም ላይ ይውላል። የተመቻቹ የEWNS ባህሪያት እሴቶችን ከመሠረታዊ EWNS ተዛማጅ እሴቶች ጋር ለማነፃፀር የቲ-ሙከራዎች ተከናውነዋል።
ምስል 2ሐ ቀደም ሲል የዳበረ እና ተለይቶ የተቀመጠ የኤሌክትሮስታቲክ ዝናብ (EPES) “መጎተት” ስርዓት ያሳያል፣ ይህም በላዩ ላይ ለኢንቨስትመንት ኢ-ዌንስ (EWNS) ኢላማ ማድረስ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል። EPES በቀጥታ ወደ ኢላማው ወለል "ሊመሩ" የሚችሉ የEVNS ክፍያዎችን ይጠቀማል፣ እነዚህም በጠንካራ የኤሌክትሪክ መስክ ተጽዕኖ ስር ናቸው። የEPES ስርዓት ዝርዝሮች በቅርብ ጊዜ በፒሪዮታኪስ እና ሌሎች 11 በታተመ ህትመት ቀርበዋል። ስለዚህ፣ EPES ባለ 3D የታተመ የ PVC ክፍልን ያቀፈ ሲሆን በ15.24 ሴ.ሜ ርቀት ላይ ሁለት ትይዩ አይዝጌ ብረት (304 አይዝጌ ብረት፣ በመስታወት የተሸፈነ) የብረት ሰሌዳዎችን ይዟል። ሰሌዳዎቹ ከውጭ ከፍተኛ ቮልቴጅ ምንጭ (በርትራን 205B-10R፣ ስፔልማን፣ ሃውፓውጅ፣ ኒውዮርክ) ጋር የተገናኙ ነበሩ፣ የታችኛው ሳህን ሁልጊዜ ከአዎንታዊ ቮልቴጅ ጋር የተገናኘ ነበር፣ እና የላይኛው ሳህን ሁልጊዜ ከመሬት (ተንሳፋፊ መሬት) ጋር የተገናኘ ነበር። የክፍሉ ግድግዳዎች በአሉሚኒየም ፎይል የተሸፈኑ ሲሆን ይህም የንጥረ ነገር መጥፋትን ለመከላከል በኤሌክትሪክ መሬት ላይ የተመሰረተ ነው። ክፍሉ የታሸገ የፊት መጫኛ በር ያለው ሲሆን ይህም የሙከራ ቦታዎች ከፍተኛ የቮልቴጅ ጣልቃ ገብነትን ለማስወገድ ከታችኛው የብረት ሳህን በላይ ከፍ የሚያደርጉ የፕላስቲክ ማቆሚያዎች ላይ እንዲቀመጡ ያስችላቸዋል።
የEWNS በEPES ውስጥ የማስቀመጥ ቅልጥፍና የተሰላው ቀደም ሲል በተዘጋጀው ተጨማሪ ምስል S111 ላይ በተዘረዘረው ፕሮቶኮል መሠረት ነው።
እንደ መቆጣጠሪያ ክፍል፣ ሁለተኛው ሲሊንደራዊ የፍሰት ክፍል ከEPES ስርዓት ጋር በተከታታይ ተገናኝቷል፣ በዚህ ውስጥ መካከለኛ የHEPA ማጣሪያ EWNSን ለማስወገድ ጥቅም ላይ ውሏል። በምስል 2c ላይ እንደሚታየው፣ EWNS ኤሮሶል በሁለት አብሮ በተሰሩ ክፍሎች ውስጥ ተጭኗል። በመቆጣጠሪያ ክፍሉ እና በEPES መካከል ያለው ማጣሪያ ተመሳሳይ የሙቀት መጠን (T)፣ አንጻራዊ እርጥበት (RH) እና የኦዞን መጠንን የሚያስከትል ማንኛውንም የቀረውን EWNS ያስወግዳል።
እንደ ኢ. ኮላይ (ATCC #27325)፣ ሰገራ አመላካች፣ ሳልሞኔላ ኢንቴሪካ (ATCC #53647)፣ የምግብ ወለድ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን፣ ሊስቴሪያ ምንም ጉዳት የሌለው (ATCC #33090)፣ ከATCC (ማናሳስ፣ VA) ሳክቻሮሚሴስ ሴሬቪሲያ (ATCC #4098) የተገኘ፣ ለበሽታ አምጪ ተህዋሲያን ሊስቴሪያ ሞኖሳይቶጅንስ ምትክ፣ ለብልሽት እርሾ ምትክ እና ማይኮባክቴሪየም ፓራሉኪ (ATCC #19686) ያሉ ትኩስ ምግቦችን እንደሚበክሉ ተረጋግጧል።
በአካባቢዎ ገበያ ውስጥ የዘፈቀደ የኦርጋኒክ ወይን ቲማቲም ሳጥኖችን ይግዙ እና እስኪጠቀሙበት ድረስ በ4°ሴ (እስከ 3 ቀናት) በማቀዝቀዣ ውስጥ ያስቀምጡ። የሙከራ ቲማቲሞቹ ሁሉም ተመሳሳይ መጠን ያላቸው፣ ዲያሜትራቸው 1/2 ኢንች ያህል ነበር።
የባህል፣ የክትባት፣ የመጋለጥ እና የቅኝ ግዛት ቆጠራ ፕሮቶኮሎች በቀደመው ህትመታችን ውስጥ በዝርዝር ተዘርዝረዋል እና በተጨማሪ መረጃው ውስጥ ተዘርዝረዋል። የEWNS ውጤታማነት የተከተቡ ቲማቲሞችን ለ45 ደቂቃዎች በ40,000 #/cm3 በማጋለጥ ተገምግሟል። ባጭሩ፣ በሕይወት የተረፉትን ረቂቅ ተሕዋስያን በ t = 0 ደቂቃ ጊዜ ለመገምገም ሶስት ቲማቲሞች ጥቅም ላይ ውለዋል። ሶስት ቲማቲሞች በEPES ውስጥ ተቀምጠው በ40,000 #/cc (EWNS የተጋለጡ ቲማቲሞች) ለEWNS ተጋልጠዋል፣ የተቀሩት ሶስት ቲማቲሞች ደግሞ በቁጥጥር ክፍል (የቁጥጥር ቲማቲሞች) ውስጥ ተቀምጠዋል። በሁለቱም ቡድኖች ውስጥ ተጨማሪ የቲማቲም ሂደት አልተከናወነም። በEWNS የተጋለጡ ቲማቲሞች እና የቁጥጥር ቲማቲሞች የEWNSን ውጤት ለመገምገም ከ45 ደቂቃዎች በኋላ ተወግደዋል።
እያንዳንዱ ሙከራ የተካሄደው በሦስት እጥፍ ነው። የውሂብ ትንተና የተከናወነው በተጨማሪ መረጃ ውስጥ በተገለጸው ፕሮቶኮል መሠረት ነው።
የማነቃቂያ ዘዴዎች የተገመገሙት የተጋለጡ የEWNS ናሙናዎችን (45 ደቂቃ በ40,000 #/cm3 EWNS ኤሮሶል ክምችት) እና በፀረ-ጨረር ያልተያዙ ጎጂ ባክቴሪያዎች ኢ. ኮላይ፣ ሳልሞኔላ ኢንቴሪካ እና ላክቶባሲለስ ናሙናዎች ውስጥ ነው። ቅንጣቶቹ በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ2 ሰዓታት በ0.1 M ሶዲየም ካኮዳይሌት ቋት (pH 7.4) ውስጥ በ2.5% ግሉታራሌይድ፣ 1.25% ፓራፎርማሌይድ እና 0.03% ፒክሪክ አሲድ ውስጥ ተስተካክለዋል። ከታጠቡ በኋላ፣ በ1% osmium tetrooxide (OsO4)/1.5% ፖታሲየም ፌሮሲያኒድ (KFeCN6) ለ2 ሰዓታት ያርቁ፣ 3 ጊዜ በውሃ ውስጥ ይታጠቡ እና በ1% uranyl acetate ውስጥ ለ1 ሰዓት ያፍሱ፣ ከዚያም ሁለት ጊዜ በውሃ ውስጥ ይታጠቡ፣ ከዚያም ለ10 ደቂቃዎች በ50%፣ 70%፣ 90%፣ 100% አልኮሆል ውስጥ ይደርቁ። ናሙናዎቹ ከዚያም ለ1 ሰዓት በፕሮፒሊን ኦክሳይድ ውስጥ ተቀምጠው በ1፡1 የፕሮፒሊን ኦክሳይድ እና TAAP Epon (ማሪቫክ ካናዳ ኢንክ. ሴንት ሎረንት፣ ካሊፎርኒያ) ድብልቅ ተጨምረዋል። ​​ናሙናዎቹ በTAAB Epon ውስጥ ተክተው ለ48 ሰዓታት በ60°ሴ ፖሊመር ተደርገዋል። የተፈወሰው ጥራጥሬ ሙጫ በTEM ተቆርጦ በAMT 2k CCD ካሜራ (Advanced Microscopy Techniques, Corp., Woburn, Massachusetts, USA) በተሰራ ባህላዊ ማስተላለፊያ ኤሌክትሮን ማይክሮስኮፕ JEOL 1200EX (JEOL፣ ቶኪዮ፣ ጃፓን) በመጠቀም ታይቷል።
ሁሉም ሙከራዎች የተከናወኑት በሦስት እጥፍ ነው። ለእያንዳንዱ የጊዜ ነጥብ፣ የባክቴሪያ ማጠቢያዎች በሦስት እጥፍ ተዘርተዋል፣ በዚህም ምክንያት በአንድ ነጥብ በአጠቃላይ ዘጠኝ የውሂብ ነጥቦች ተገኝተዋል፣ ከእነዚህም ውስጥ አማካይ ለዚያ የተወሰነ ረቂቅ ተሕዋስያን የባክቴሪያ ክምችት ሆኖ አገልግሏል። መደበኛ መዛባት እንደ የመለኪያ ስህተት ጥቅም ላይ ውሏል። ሁሉም ነጥቦች ይቆጠራሉ።
የባክቴሪያ ክምችት መቀነስ ከ t = 0 ደቂቃ ጋር ሲነጻጸር ሎጋሪዝም የሚከተለውን ቀመር በመጠቀም ተሰልቷል፡
C0 በቁጥጥር ናሙናው ውስጥ በ0 ሰዓት (ማለትም ወለሉ ከደረቀ በኋላ ግን በክፍሉ ውስጥ ከመቀመጡ በፊት) ውስጥ የባክቴሪያ ክምችት ሲሆን Cn ደግሞ በ n ደቂቃዎች ከተጋለጡ በኋላ በገጽ ላይ የባክቴሪያ ክምችት ነው።
በ45 ደቂቃ ተጋላጭነት ወቅት የባክቴሪያን ተፈጥሯዊ መበላሸት ለማካካስ፣ ከ45 ደቂቃ በኋላ ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር የምዝግብ ማስታወሻ ቅነሳ እንደሚከተለው ተሰልቷል፡
ሲን በመቆጣጠሪያ ናሙና ውስጥ የባክቴሪያ ክምችት ሲሆን በጊዜ n እና ሲን-ኮንትሮል በጊዜ n የቁጥጥር ባክቴሪያዎች ክምችት ነው። መረጃው ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር እንደ ሎግ ቅነሳ ቀርቧል (ምንም የ EWNS ተጋላጭነት የለም)።
በጥናቱ ወቅት፣ በመርፌው እና በቆጣሪው ኤሌክትሮድ መካከል በርካታ የቮልቴጅ እና የርቀት ጥምረቶች በቴይለር ኮን ምስረታ፣ በቴይለር ኮን መረጋጋት፣ በEWNS የምርት መረጋጋት እና በድጋሜ መባዛት ረገድ ተገምግመዋል። የተለያዩ ጥምረቶች በተጨማሪ ሠንጠረዥ S1 ውስጥ ይታያሉ። ለአጠቃላይ ጥናት የተረጋጋ እና ሊባዙ የሚችሉ ባህሪያትን የሚያሳዩ ሁለት ጉዳዮች (ቴይለር ኮን፣ EWNS ማመንጨት እና በጊዜ ሂደት መረጋጋት) ተመርጠዋል። በምስል 3 ላይ በሁለቱም ጉዳዮች ላይ የ ROS ክፍያ፣ መጠን እና ይዘት ውጤቶችን ያሳያል። ውጤቶቹም በሰንጠረዥ 1 ውስጥ ተጠቃለዋል። ለማጣቀሻ፣ ሁለቱም ምስል 3 እና ሠንጠረዥ 1 ቀደም ሲል የተዋሃዱ ያልተመቻቹ EWNS8፣ 9፣ 10፣ 11 (መሰረታዊ-EWNS) ባህሪያትን ያካትታሉ። ባለ ሁለት ጭራ ቲ-ሙከራን የሚጠቀሙ የስታቲስቲክስ ጠቀሜታ ስሌቶች በተጨማሪ ሠንጠረዥ S2 ውስጥ እንደገና ታትመዋል። በተጨማሪም፣ ተጨማሪ መረጃዎች የቆጣሪ ኤሌክትሮድ ናሙና ቀዳዳ ዲያሜትር (D) እና በመሬት ኤሌክትሮድ እና ጫፍ (L) መካከል ያለውን ርቀት ጥናቶችን ያካትታሉ (ተጨማሪ ምስሎች S2 እና S3)።
(ac) በAFM የሚለካ የመጠን ስርጭት። (df) የገጽታ ክፍያ ባህሪ። (g) የEPR የROS ባህሪ።
ከላይ በተጠቀሱት ሁኔታዎች ሁሉ፣ የተለካው የአዮኒዜሽን ፍሰት ከ2 እስከ 6 μA እና ቮልቴጅ ከ -3.8 እና -6.5 kV መካከል እንደነበር ልብ ማለት አስፈላጊ ነው፣ ይህም ለዚህ ነጠላ EWNS ትውልድ የመገናኛ ሞጁል ከ 50 mW ያነሰ የኃይል ፍጆታ አስከትሏል። ምንም እንኳን EWNS በከፍተኛ ግፊት ስር የተዋሃደ ቢሆንም፣ የኦዞን መጠን በጣም ዝቅተኛ ነበር፣ ከ 60 ppb ፈጽሞ አይበልጥም።
ተጨማሪ ምስል S4 ለ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] እና [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ] ሁኔታዎች የተመሰሉትን የኤሌክትሪክ መስኮች በቅደም ተከተል ያሳያል። ለ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] እና [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ] ሁኔታዎች፣ የመስክ ስሌቶቹ በቅደም ተከተል 2 × 105 V/m እና 4.7 × 105 V/m ናቸው። ይህ የሚጠበቀው በሁለተኛው ሁኔታ የቮልቴጅ-ርቀት ጥምርታ በጣም ከፍ ያለ ስለሆነ ነው።
በምስል 3a,b ላይ የEWNS ዲያሜትር በAFM8 የተለካ ያሳያል። የተሰሉት አማካይ የEWNS ዲያሜትሮች ለ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] እና [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ] እቅዶች በቅደም ተከተል 27 nm እና 19 nm ነበሩ። ለ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] እና [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ] ሁኔታዎች፣ የስርጭቶቹ የጂኦሜትሪክ መደበኛ ልዩነቶች በቅደም ተከተል 1.41 እና 1.45 ሲሆኑ ጠባብ የመጠን ስርጭትን ያመለክታሉ። አማካኝ መጠንም ሆነ የጂኦሜትሪክ መደበኛ መዛባት በቅደም ተከተል ከመሠረታዊ EWNS በጣም ቅርብ ናቸው፣ በ25 nm እና 1.41፣ በምስል 3c ላይ በተመሳሳይ ሁኔታ በተመሳሳይ ዘዴ የሚለካውን የመሠረት EWNS መጠን ስርጭት ያሳያል።
በምስል 3d፣e ላይ የክፍያ ባህሪ ውጤቶችን ያሳያል። መረጃው 30 በአንድ ጊዜ የማጎሪያ (#/cm3) እና የአሁኑ (I) መለኪያዎች አማካይ መለኪያዎች ናቸው። ትንታኔው እንደሚያሳየው በEWNS ላይ ያለው አማካይ ክፍያ በቅደም ተከተል 22 ± 6 e- እና 44 ± 6 e- ነው [-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] እና [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ]። ከመነሻ EWNS (10 ± 2 e-) ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ከፍ ያለ የገጽታ ክፍያዎች አሏቸው፣ ከ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] ሁኔታ ሁለት እጥፍ የሚበልጥ እና ከ[-3 .8 kV፣ 0.5 ሴሜ] በአራት እጥፍ የሚበልጥ። ምስል 3f የመሠረታዊ-EWNS ክፍያ መረጃን ያሳያል።
ከEWNS ቁጥር የማጎሪያ ካርታዎች (ተጨማሪ አሃዞች S5 እና S6)፣ [-6.5 kV፣ 4.0 ሴሜ] ሁኔታ ከ [-3.8 kV፣ 0.5 ሴሜ] ሁኔታ በእጅጉ የበለጠ ቅንጣቶች እንዳሉት ማየት ይቻላል። እንዲሁም የEWNS ቁጥር ክምችት እስከ 4 ሰዓታት ድረስ ክትትል እንደተደረገበት ልብ ሊባል የሚገባው ነው (ተጨማሪ አሃዞች S5 እና S6)፣ የEWNS ትውልድ መረጋጋት በሁለቱም ሁኔታዎች ተመሳሳይ የንጥረ ነገር ብዛት ክምችት ደረጃዎችን አሳይቷል።
በምስል 3g ላይ የተመቻቸ የEWNS መቆጣጠሪያ (ዳራ) በ[-6.5 kV፣ 4.0 ሴ.ሜ] ከተቀነሰ በኋላ የEPR ስፔክትረም ያሳያል። የROS ስፔክትራዎች ቀደም ሲል በታተመ ሥራ ውስጥ ከቤዝላይን-EWNS ሁኔታ ጋርም ተነጻጽረዋል። ከስፒን ወጥመዶች ጋር የሚገናኙ የEWNS ብዛት 7.5 × 104 EWNS/s እንደሆነ ተሰልቷል፣ ይህም ቀደም ሲል ከታተመው ቤዝላይን-EWNS8 ጋር ተመሳሳይ ነው። የEPR ስፔክትራ ሁለት የROS ዓይነቶች መኖራቸውን በግልጽ አሳይቷል፣ O2- ዋና ዋና ዝርያዎች ሲሆኑ OH• ደግሞ ብዙም አልበዛም። በተጨማሪም፣ የከፍተኛ ጥንካሬዎች ቀጥተኛ ንጽጽር የተመቻቸ EWNS ከመነሻ EWNS ጋር ሲነጻጸር በጣም ከፍ ያለ የROS ይዘት እንዳለው አሳይቷል።
በምስል 4 ላይ የEWNS በEPES ውስጥ የማስቀመጥ ቅልጥፍናን ያሳያል። መረጃው በሰንጠረዥ I ውስጥ ተጠቃልሎ ከዋናው EWNS መረጃ ጋር ተነጻጽሯል። ለሁለቱም የEUNS ጉዳዮች፣ የማስቀመጥ ብቃቱ በ3.0 kV ዝቅተኛ ቮልቴጅ እንኳን ወደ 100% ይጠጋል። በተለምዶ፣ የገጽታ ክፍያ ለውጥ ምንም ይሁን ምን፣ 3.0 kV ለ100% የማስቀመጥ ብቃቱ በቂ ነው። በተመሳሳይ ሁኔታዎች፣ የBaseline-EWNS የማስቀመጥ ቅልጥፍና ዝቅተኛ ቻርጅ በመኖሩ ምክንያት 56% ብቻ ነበር (በEWNS አማካይ 10 ኤሌክትሮኖች)።
በምስል 5 እና በሰንጠረዥ 2 ላይ። በቲማቲም ወለል ላይ ለ45 ደቂቃዎች በ40,000 #/cm3 EWNS ከተጋለጡ በኋላ የተከተቡ ረቂቅ ተሕዋስያንን የማነቃቃት እሴት በአመቺ ሁኔታ [-6.5 kV፣ 4.0 ሴ.ሜ] ያጠቃልላል። የተከተቡ ኢ. ኮላይ እና ላክቶባሲለስ ምንም ጉዳት የሌላቸው በ45 ደቂቃ ተጋላጭነት ወቅት 3.8 ሎጎች በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሰዋል። በተመሳሳይ ሁኔታ፣ ኤስ. ኢንቴሪካ 2.2-ሎግ ቅናሽ አሳይቷል፣ ኤስ. ሴሬቪሲያ እና ኤም. ፓራፎርቱቱም ደግሞ 1.0-ሎግ ቅናሽ አሳይተዋል።
የኤሌክትሮን ማይክሮግራፎች (ምስል 6) EWNS ጉዳት በሌለው የኤስቼሪቺያ ኮላይ፣ ስትሬፕቶኮከስ እና ላክቶባሲለስ ሴሎች ላይ ያስከተላቸውን አካላዊ ለውጦች ያሳያሉ፤ ይህም እንዳይነቃቁ ያደረጋቸውን የቁጥጥር ባክቴሪያዎቹ ያልተነኩ የሴል ሽፋኖች ነበሯቸው፤ የተጋለጡት ባክቴሪያዎች ደግሞ ውጫዊ ሽፋኖችን አበላሽተዋል።
የቁጥጥር እና የተጋለጡ ባክቴሪያዎች የኤሌክትሮን ማይክሮስኮፕ ምስል የሽፋን ጉዳትን አሳይቷል።
በተመቻቸ EWNS ፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት ላይ ያለው መረጃ በጋራ እንደሚያሳየው የEWNS ባህሪያት (የገጽታ ክፍያ እና የROS ይዘት) ቀደም ሲል ከታተመው የEWNS መነሻ መረጃ8,9,10,11 ጋር ሲነጻጸር በእጅጉ ተሻሽለዋል። በሌላ በኩል መጠናቸው በናኖሜትር ክልል ውስጥ ቆይቷል፣ ይህም ቀደም ሲል ከተዘገቡት ውጤቶች ጋር በጣም ተመሳሳይ ነው፣ ይህም ለረጅም ጊዜ በአየር ውስጥ እንዲቆዩ ያስችላቸዋል። የታየው ፖሊዲስፐርሲቲ የEWNS መጠንን፣ የሬይሊ ተፅዕኖን የዘፈቀደነት እና እምቅ ውህደትን በሚወስኑ የወለል ክፍያ ለውጦች ሊገለጽ ይችላል። ሆኖም፣ በኒልሰን እና ሌሎች 22 እንደተብራራው፣ ከፍተኛ የገጽታ ክፍያ የውሃ ጠብታውን የገጽታ ኃይል/ውጥረት ውጤታማ በሆነ መንገድ በመጨመር ትነት ይቀንሳል። በቀደመው ህትመታችን 8 ላይ ይህ ንድፈ ሐሳብ ለማይክሮ ጠብታዎች 22 እና EWNS በሙከራ ተረጋግጧል። በትርፍ ሰዓት ጊዜ ውስጥ የኃይል ማጣት መጠኑን ሊነካ እና ለተመለከተው የመጠን ስርጭት አስተዋጽኦ ሊያደርግ ይችላል።
በተጨማሪም፣ በአንድ መዋቅር ያለው ክፍያ 22-44 e- አካባቢ ሲሆን፣ እንደ ሁኔታው ​​ይለያያል፣ ይህም ከመሠረታዊ EWNS ጋር ሲነጻጸር በእጅጉ ከፍ ያለ ነው፣ ይህም በአንድ መዋቅር አማካይ 10 ± 2 ኤሌክትሮኖች አሉት። ሆኖም፣ ይህ የ EWNS አማካይ ክፍያ መሆኑን ልብ ሊባል ይገባል። ሴቶ እና ሌሎችም። ክፍያው ኢ-ኦሞጂኔኦሎጂካል እና የሎግ-መደበኛ ስርጭት21ን የሚከተል መሆኑን ታይቷል። ከቀደመው ስራችን ጋር ሲነጻጸር፣ የገጽታ ክፍያውን በእጥፍ ማሳደግ በEPES ስርዓት ውስጥ ያለውን የማስቀመጫ ቅልጥፍና ወደ 100%11 ያህል በእጥፍ ያሳድጋል።